Farmacocinetica

ANÁLISIS FARMACOCINÉTICO SOBRE LA DISTRIBUCIÓN, LA ELIMINACIÓN Y LA INFLUENCIA DEL PH URINARIO EN LA ELIMINACIÓN DEL ACIDO ACETIL SALICÍLICO
Nicolás Castillo M. – 11219009
Sebastián Flórez S. – 11220022
Universidad Icesi, Facultad de ciencias Naturales
Laboratorio de Biofarmacia - 2014
Santiago de Cali, Colombia
Resumen.
1. Introducción
2. Materiales y Métodos
2.1. Unión del fármaco ala proteína.
Se realizo la elaboración de 5 soluciones rotuladas como A, B, C, D, E para el análisis de la unión del ASA a la albumina. Primero se realizo la solución A la que simula un compartimiento sin albumina, la solución B simulara en este caso un compartimiento que contiene albumina y la solución C tiene como finalidad ser el blanco para la solución B.
En la solución A se adiciono 20 mLcon 5 mL de la solución del fármaco. En la solución B se adiciono 20 mL de albumina (4 g/Dl) con 5 mL de la solución del fármaco. En la solución C se adiciono 20 mL de albumina con 5 mL de agua destilada. Posteriormente se agito vigorosamente con el fin de hacer que todo el fármaco interactuara con la albumina, teniendo una distribución equivalente (Universidad Icesi, NA.).
2.2. Separación delfármaco libre.
Después se realizo la preparación de las soluciones D y E. Al primero se le agregó 5 mL de la solución B y se le adiciono 5 mL de la solución de acido tricloroacetico al 10%. Para la solución E se agregaron 5 mL de la solución C y se le adiciono 5 mL de la solución de acido tricloroacetico al 10%.
Estas soluciones se hicieron con el fin de precipitar y separar el fármaco unido aalbumina utilizando el ácido tricloroacético y además centrifugando a 8000 rpm por 10 min, por último se filtró el sobrenadante de la solución D que contenía albumina y la solución de fármaco (Ibíd.).
2.3. Formación del complejo coloreado.
Para la formación del complejo coloreado se tuvieron 5 tubos de ensayo a los cuales se les adiciono 5 mL de nitrato férrico. Al tubo 1 se le adiciono 1 mL deagua destilada (blanco 1), al tubo 2 se le adiciono 1 mL de la solución de salicilato de sodio 0.2 mg/mL (patrón 1), al tubo 3 se le adiciono 1 mL de la solución A. En el tubo 4 se adiciono 1 mL del sobrenadante de la solución D, al tubo 5 se adiciono 1 mL del sobrenadante de la solución E (blanco 2, para el tubo 4) (Ibíd.).
2.4. Lectura de la concentración de acido salicílico.
La lectura serealizo por procedimiento espectrofotométrico, se midió la absorbancia de los complejos entre iones férricos y el acido salicílico a una longitud de onda de 540 nm.
Para esto se ajusto a cero con el tubo 1 (blanco 1) y se midió la absorbancia del tubo 2 y el tubo 3. De nuevo se ajusto a cero con el tubo 5 (blanco 2) y se midió la absorbancia del tubo 4 (Ibíd.).
2.5. Preparación del estándar desalicilatos para el análisis de eliminación de fármacos.
Se elaboro una solución stock de 1 mg/mL de salicilato de sodio en agua destilada, con unas gotas de cloroformo con el fin de conservar la solución (Universidad Icesi, NA.).
2.6. Curva patrón de salicilatos
Se elaboraron 4 soluciones más a partir de la solución stock, las cuales obtuvieron una concentración de 5, 10, 20 y 60 µg/mL. A estassoluciones se le adiciono 6 mL del reactivo de Trinder y posteriormente se midió la absorbancia de cada una de estas soluciones a una longitud de onda de 540 nm, con el fin de obtener una curva patrón (Ibíd.).
2.7. Análisis de salicilato en orina
Tabla 1. Análisis de salicilato en orina.
Tiempo Labor realizada
0 min Cada uno de los voluntarios se tomo media tableta de aspirina de 500 mg en unvolumen de 200 mL con:
Grupo alcalotico: 10g Bicarbonato
Grupo acidotico: 3 g de cloruro de amonio
Grupo control: Agua
20 min Se colecto la orina, se midió el volumen y el pH y se tomo una muestra.
40 min Se colecto la orina, se midió el volumen y el pH y se tomo una muestra.
60 min Se colecto la orina, se midió el volumen y el pH y se tomo una muestra.
80 min Se colecto la orina, se...