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I. PRÁCTICA No. 1
PREPARACIÓN DE CORTES HISTOLÓGICOS Y REACCIONES HISTOQUÍMICAS
1.1 Marco teórico
La calidad de los cortes histológicos es fundamental para que sean útiles en la observación microscópica y en la posterior identificación de los metabolitos con reacciones histoquímicas.
La observación de las estructuras biológicas es difícil porque:
a) las células son de pequeño tamaño yb) son transparentes a la luz visible

La mayoría de los componentes celulares son transparentes, a excepción de algunos pigmentos de las células vegetales; dichos componentes celulares presentan muy escaso contraste por su alto contenido de agua. Para contrarrestar esta limitación se emplea diversos colorantes.
Por lo tanto los tejidos deben ser sometidos a procesos de fijación,deshidratación, inclusión y cortes antes de su coloración; estos procedimientos deben realizarse con mucho cuidado para evitar cambios morfológicos.
Para el reconocimiento de los diferentes metabolitos se emplean reactivos que producirán colores específicos o precipitados, los cuales se observaran al microscopio.

1.2 Competencias

- Aprender a preparar cortes histológicos vegetales- Aprender técnicas de coloración y montaje de los cortes histológicos
- Realizar reacciones histoquímicas en cortes de muestras vegetales para el reconocimiento de metabolitos.

1.3 Materiales y equipos

Microscopio compuesto
Láminas porta objetos
Laminillas cubre objetos
Frasco gotero
Pinzas
Placas petri o (frasco de boca ancha)
Pincel de pelo fino (para recogerlos cortes)
Hojas de afeitar (Gillette)
Glicerina
Alcohol 70º
Gelatina
Hipoclorito de sodio al 50%
Safranina al 15%
Tallos tiernos (menos de 1cm de diámetro) de plantas medicinales
Hojas de plantas medicinales
Reactivos de reconocimiento: tricloruro de fierro, lugol, reactivo de dragendorf, safranina, sudan III.

1.4 Procedimiento

Los cortes histológicos (transversales,longitudinales y paradermales) del tallo y hojas de las plantas, se preparan siguiendo la técnica a mano libre y se colocan en una placa petri con agua.
Los cortes más delgados se recogen con el extremo del pincel algo humedecido y se depositan en 1 - 2 gotas de agua que se han colocado al centro del porta objeto ( con un gotero ).
Luego con el cubreobjetos completamente limpio y en posición de45º con respecto al portaobjeto se deja caer, procurando evitar burbujas de aire.
Observar en el microscopio compuesto, seleccionar el mejor corte y luego agregar cada reactivo para el reconocimiento de los diferentes metabolitos.

1.5 Resultados

Las muestras que contienen almidones se tiñen de color azul, los alcaloides se tiñen de color anaranjado, los taninos se tiñen de color verde o azul,los lípidos se tiñen de color rojizo.
1.6 Cuestionario

¿Cómo realiza la preparación de los cortes histológicos para el reconocimiento de muestras vegetales?
¿Qué es una reacción histoquímica?




II. PRÁCTICA No. 2
PREPARACIÓN DE EXTRACTOS PARA EL ESTUDIO FITOQUÍMICO
2.1 Marco teórico
La extracción es el proceso más utilizado para el estudio fitoquímico de las plantas medicinalesy consiste en la separación de las porciones medicinalmente activas de los componentes inertes a partir de las muestras de plantas mediante el uso de disolventes selectivos. Se utiliza para ello procedimientos establecidos y estandarizados.
Los métodos principales de extracción son: maceración, percolación, digestión, infusión y decocción.
Para la preparación de los extractos se debe tomar encuenta varios factores como:
Grado de división de la droga
Temperatura
pH del medio
Naturaleza química de la sustancia a extraer
Grado de absorción de agua
Estandarización de la materia prima









2.2 Competencias
- Aprender a preparar extractos de plantas medicinales
- Aprender técnicas de extracción

2.3 Materiales y equipos
Balanza
Molino
Frascos...