Fecundacion in vitro en camelidos

EFECTO DE LA ATMÓSFERA DE CULTIVO SOBRE EL DESARROLLO DE EMBRIONES DE ALPACAS PRODUCIDOS POR FECUNDACIÓN IN VITRO
Elizabeth Huamán1, Flamel Ticllacuri1, Leandra Landeo1, Jaime Ruiz1*.
1 Laboratorio de Biotecnologías Reproductivas. Universidad Nacional de Huancavelica.

RESUMEN
El objetivo fue evaluar el efecto de dos atmósferas de cultivo sobre el desarrollo de embriones de alpacasproducidos por fecundación in vitro. Se utilizaron 400 ovocitos aspirados desde ovarios de alpacas beneficiadas, los cuales fueron madurados in vitro por 25 horas en medio de maduración suplementado con suero fetal bovino (SFB), sulfato de Gentamicina, estradiol, FSH y Piruvato de Na. Finalizado el periodo de maduración, los ovocitos maduros fueron colocados en gotas de 50 ul de FERT-TALP suplementado con3 mg/ml BSA, 10% de Sulfato de Gentamicina y 10% de Piruvato de Na y fueron fecundados con 10 ul de espermatozoides epididimarios recuperados por el método de Swin up. Después de 18 horas de fecundación los posibles embriones fueron transferidos a gotas de 50 ul de medio de cultivo SOF-IVC suplementado con 3 mg/ml de BSA. Un grupo de 200 ovocitos fecundados fueron cultivados en atmósfera decultivo con 5% de CO2 y otro grupo de 200 ovocitos fecundados fueron cultivados en una atmósfera con 90% N2, 5% CO2 y 5% O2 por un periodo de 8 días. Los resultados para los embriones cultivados en una atmósfera con 5% de CO2 fueron: 86.36%, 78.26% y 10.04%; y para los embriones cultivados en una atmósfera con 90% N2, 5% CO2 y 5% O2 fueron: 91.28%, 86.11% y 11.22% de división, mórula y blastocistosrespectivamente; sin diferencias estadísticas significativas entre ambas atmósferas de cultivo.
PALABRAS CLAVE: Alpaca, ovocito, embrión, fecundación in vitro, atmósfera de cultivo.

ABSTRACT
The objective was to evaluate the effect of two culture atmospheres on the development of alpaca embryos produced by in vitro fertilization. 400 oocytes were aspirated from ovaries of dead alpacas, whichwere matured in vitro for 25 h in maturation medium supplemented with fetal bovine serum (FBS), gentamicin sulfate, estradiol, FSH and Na Pyruvate. After the maturation period, mature oocytes were placed in 50 ul drops of FERT-TALP supplemented with 3 mg / ml BSA, 10% gentamicin sulfate and 10% Na Pyruvate and were fertilized with 10 ul of epididymal sperm retrieved by the method of Swin up. After18 hours of fertilization, embryos were transferred to 50 ul drops of SOF-IVC supplemented with 3 mg/ml BSA. A group of 200 fertilized oocytes were cultured in culture atmosphere with 5% CO2 and another group of 200 fertilized oocytes were cultured in an atmosphere containing 90% N2, 5% CO2 and 5% O2 for a period of 8 days. The results for the embryos cultured in an atmosphere of 5% CO2 were86.36%, 78.26% and 10.04% and for embryos cultured in an atmosphere containing 90% N2, 5% CO2 and 5% O2 were: 91.28%, 86.11% and 11.22% of division, morula and blastocyst respectively; without statistically significant differences between the two atmospheres for cultivation.
KEY WORDS: Alpaca, oocyte, embryo, in vitro fertilization, culture atmosphere.

INTRODUCCION
La fecundación in vitro (FIV) esel procedimiento por medio del cual ovocitos maduros son cultivados junto con espermatozoides y de esta forma fecundados. La utilización de la FIV en camélidos sudamericanos podría ser una alternativa para el mejoramiento genético de camélidos domésticos y para la preservación de los camélidos silvestres. A pesar de ello escasos estudios se han realizado sobre la maduración in vitro de ovocitos(Del Campo et al. 1992, Chaves et al. 2003, Ratto et al. 2005, Ruiz y Correa 2007, Ratto et al. 2007, Huanca et al. 2009) y fecundación in vitro en camélidos sudamericanos (Del Campo et al. 1994, Conde et al. 2006, Gamarra et al. 2008, Mendoza et al. 2008, Machicado et al. 2009, Huanca et al. 2010, Condori et al. 2010, Berland et al. 2011). Para el cultivo de embriones se han utilizado fases...