Fenofltaleina

MÉTODO FENOL-SULFÚRICO COLORIMÉTRICOS
El azúcar se torna principalmente hidroximetilfurfural (hmf) o furfural (f) los cuales son realmente determinados leyendo la absorbancia a 490nm
h2so4conc.
Fenol + carbohidrato → amarillo – naranja
Calor
VENTAJAS:
* Es sencillo
* Es rápido
* Sensible a muy bajos niveles de azúcar (e.g. 5μg)
* Específico para carbohidratos.* No existe interferencia con proteínas
* A menudo no es necesaria la clarificación de la muestra
* Los reactivos son baratos y estables
* Color estable
* Resultadosreproducibles
* Resultados confiables

DESVENTAJAS:
* Los carbohidratos que no proporcionan hmf y f en la descomposición ácida resultan en una amplia gama de colores. por tanto el método nomide todos los carbohidratos
* Mide la mayoría de los carbohidratos pero la intensidad del color varía ampliamente entre los carbohidratos, por lo que se debe seleccionar uno de ellos comoreferencia
* La proporción de h2so4 es muy importante ya que se adiciona h2so4 como fuente de calor a la muestra acuosa.
* Se debe evitar la contaminación proveniente del papel filtro opolvo de celulosa

MÉTODO DINITROSALICILICO
PASOS PARA PREPARAR DNS:
* Disolver 1.6 gr de NaOH H2O destilada.
* Agregar 30 gr de tartrato de Na y K
* Adicionar 1 gr de DNS
*Aforar a 100 ml con H2O
* Almacenar en frasco ambar
Se debe mantener un stock de glucosa de 4 mg/ml y almacenado a 4°. Partir de la solución de glucosa se preparan las soluciones para hacerla curva patrón.
PROCEDIMIENTO:
* Tomar 0.5 ml de cada dilución y agregar 0.5 de reactivo DNS.
* Preparar una muestra blanco por disolución de 0.5 ml de H2O destilada a 0.5 ml de DNS.* Agitar las muestras
* Colocar a ebullir las muestras en baño maría por 5 minutos.
* Enfriar en hielo
* Adicionar 5 ml de H2O
* Agitar y dejar en reposo
* Hacer la curva.