fermentacion



INFORME PRACTICA 2
ESTRUCTURA DE AMINOACIDOS Y PRECIPITACION DE LA CASEINA











JAMES A. BARRERA COD 511508
LINDA GIRLESSA IMBAGO ROJAS COD 511535









DOCENTE: DIANA MILENA MEJIA










UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA SEDE PALMIRA
FACULTAD DE INGENIERIA Y ADMINISTRACIÓN
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
17 DE ABRIL DE 2013
Las proteínasson constituyentes esenciales para los organismos, tienen diversidad de funciones: catálisis, estructura, movimiento, defensa, regulación, transporte, almacenamiento, respuesta a las agresiones.
Las proteínas están compuestas por unidades más simples, los aminoácidos.

Con el fin de determinar los constituyentes de la leche, se realizó una serie de pruebas y se encontró que la caseína comprendeel 80% de la proteína de la leche y el resto el suero. Seguidamente se determinó la presencia de carbohidratos y calcio.

PROTOCOLO.

1. PRECIPITACIÓN DE LA CASEINA








2. VERIFICACION DE PRESENCIA DE PROTEINAS





3. DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE CARBOHIDRATOS (LACTOSA)



4. DETERMINACION DE LA PRESENCIA DE CALCIO


RESULTADOS Y ANALISIS
1. pH inicial de laleche = 6,7
Acidificamos el medio pH= 4,7 adicionando 70 gotas de ácido acético.
La proteína precipita, la filtramos y pesamos.
Peso caseína= 9.91 gramos.


ANALISIS
La composición de aminoácidos, es responsable del comportamiento de las proteínas en diferentes condiciones de pH. Así al acidificar o alcalinizar una determinada proteína, ésta puede llegar a su punto isoeléctrico, esdecir, alcanzar una carga neta de cero y por lo tanto precipitar. La leche es un producto rico en proteínas, La caseína comprende casi el 80% de proteína de la leche y se puede separar (precipitar) acidificando el medio hasta obtener un aproximadamente un pH de 4,7 en el que alcanza su punto isoeléctrico.






2. Reactivo biuret. VERIFICACION DE PRESENCIA DE PROTEINAS
Reactivo deBiuret: cambio en coloración de incoloro a violeta en Caseína y suero. Hubo mayor coloración en la caseína que en el suero.

ANALISIS
El reactivo de Biuret es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida. Está hecho de hidróxido de potasio (KOH) y sulfato de cobre (CuSO4), juntocon tartrato de sodio y potasio (KNaC4H4O6·4H2O). El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipeptidos  de cadena corta. En la práctica se observó mayor coloración en el tubo que contenía caseína que el tubo con suero. Lo que indica que la mayor proporción de proteína está en la caseína, pero el suero también contiene proteínas (tiamina,riboflavina, ácido pantotéico y vitaminas A, D y K)







3. DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE CARBOHIDRATOS (LACTOSA)


REACTIVO DE BENEDICT
Reactivo que sirve para identificar reductores de azucares como la lactosa

se le aplica el reactivo de Benedict al suero y calor durante 2 o 3 minutos y veremos que  paso.
ANALISIS .
El precipitado azul claro que se introdujo en baño maría setorno marrón anaranjado, lo cual nos indica que la sustancia contiene glucosa. 
Esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).









4. DETERMINACION DE LA PRESENCIA DE CALCIO

Cambio en lacoloración y formación de un precipitado blanco después de la adición de oxalato de amonio.
ANÁLISIS:
Al suero procedente del filtrado anterior se le adiciona el oxalato de amonio, se observo la aparición de un precipitado blanco
Al alcalinizar con amoníaco, una solución ácida que contenga calcio y ácido oxálico (o algún oxalato soluble como el de sodio o de amonio), se produce la...