Fijación de muestras histológicas
Páginas: 22 (5499 palabras)
Publicado: 21 de febrero de 2012
Trabajo Histología: Fijación de Muestras
Introducción
El estudio directo de células y tejidos vivos tiene aplicaciones limitadas, además el tejido presenta un espesor donde la penetración de luz es demasiado escasa, en consecuencia se utiliza con mayor frecuencia tejido muerto que se corta en secciones muy delgadas denominadas cortes histológicos. Se hace una fijación y tinción y seobservan los cortes al microscopio óptico.
Por otra parte las células vivas como las capas delgadas de tejido pueden observarse directamente sin tener que hacer cortes finos, pero en la mayor parte de los tejidos es necesario hacer cortes histológicos muy finos que se colocan sobre portaobjetos antes de ser estudiados, para su posterior observación.
La preparación ideal debería preservar laestructura y composición molecular existente en el cuerpo
La preparación de la muestra fijación es un proceso que consta de varios pasos:
• Fijación
• Deshidratación
• Aclaramiento
• Inclusión
• Corte
• Montaje
Las células se matan con la fijación para detener los procesos celulares dinámicos. Esto se logra con la insolubilización de los componentes estructurales de la célula por la acciónde agentes químicos denominados fijadores.
De esta manera se consigue:
• Mantener el tejido en su estado natural y evitar su desintegración, para ello se inactivan enzimas celulares que de no ser así conducirían a la degeneración post-mortem
• Endurecer el material y así conseguir mejor capacidad de corte
• Eliminar bacterias u otros agentes que existan en la muestrapara el examen
El resultado de la fijación es una imagen equivalente del tejido que se quiere estudiar, sin embargo no se debe de olvidar que se examinan células muertas y que tienen modificaciones químicas
Estas técnicas se usan en anatomía patológica, investigación clínica e histología
En la práctica la fijación se lleva a cabo por:
• Inmersión: Se introduce un pequeño trozo detejido en el fijador
• Perfusión: En la que el órgano se infiltra con el medio de fijación a través de su sistema vascular
Hay diferentes fijadores, como el formaldehido, glutaraldehido, y otros como el tetraóxido de osmio etc.
El estudio de la morfologia se hace en celulas muertas fijadas de manera que mantienen su estructura como si estuvieran vivas , para ello se realiza la fijacionde las proteínas para detener la actividad celular protegiendo las células de un ataque bacteriano o putrefacción y preparar los tejidos para procedimientos histológicos posteriores.
Los métodos de fijación pueden ser físicos o químicos . El físico consiste en cambios rapidos de temperaturas , con calor y por congelación inmediata sumergiendo el tejido en nitrógeno liquido dejando el tejidolisto para cortar con un micrótomo.
Los métodos químicos consisten en exponer el tejido a agentes químicos para provocar la formación de puentes transversales de unión entre moléculas adyacentes de proteínas tisulares .Los agentes químicos en microscopia óptica mas utilizados en microscopia óptica son el formaldehido 5% , formol 10% o liquidos como de Bouin o Helly . En microscopia electrónica elfijador mas empleado es glutaraldehido y el tetraoxido de osmio. Se emplean dos tipos de las técnicas para fijación química la técnica de perfusión y la técnica de inmersión.En la primera se coloca el fijador en una jeringuilla y se inyecta en el torrente sanguíneo del animal de manera que se distribuya por todo el organismo , una vez fijado podemos disecarlo para obtener el órgano de interés . Enla técnica de inmersión se cortan tubos de tejido se identifican , se colocan en un recipiente de plástico y se pasan a un recipiente con fijador . Se utiliza un volumen de fijador 50 veces mayor al tamaño de la muestra y mantenerla en el fijador de 1 a 24 h. Se cortan en delgadas rebanadas , antes de este paso se necesita uno previo ya que el alto contenido en agua dificulta el proceso para...
Introducción
El estudio directo de células y tejidos vivos tiene aplicaciones limitadas, además el tejido presenta un espesor donde la penetración de luz es demasiado escasa, en consecuencia se utiliza con mayor frecuencia tejido muerto que se corta en secciones muy delgadas denominadas cortes histológicos. Se hace una fijación y tinción y seobservan los cortes al microscopio óptico.
Por otra parte las células vivas como las capas delgadas de tejido pueden observarse directamente sin tener que hacer cortes finos, pero en la mayor parte de los tejidos es necesario hacer cortes histológicos muy finos que se colocan sobre portaobjetos antes de ser estudiados, para su posterior observación.
La preparación ideal debería preservar laestructura y composición molecular existente en el cuerpo
La preparación de la muestra fijación es un proceso que consta de varios pasos:
• Fijación
• Deshidratación
• Aclaramiento
• Inclusión
• Corte
• Montaje
Las células se matan con la fijación para detener los procesos celulares dinámicos. Esto se logra con la insolubilización de los componentes estructurales de la célula por la acciónde agentes químicos denominados fijadores.
De esta manera se consigue:
• Mantener el tejido en su estado natural y evitar su desintegración, para ello se inactivan enzimas celulares que de no ser así conducirían a la degeneración post-mortem
• Endurecer el material y así conseguir mejor capacidad de corte
• Eliminar bacterias u otros agentes que existan en la muestrapara el examen
El resultado de la fijación es una imagen equivalente del tejido que se quiere estudiar, sin embargo no se debe de olvidar que se examinan células muertas y que tienen modificaciones químicas
Estas técnicas se usan en anatomía patológica, investigación clínica e histología
En la práctica la fijación se lleva a cabo por:
• Inmersión: Se introduce un pequeño trozo detejido en el fijador
• Perfusión: En la que el órgano se infiltra con el medio de fijación a través de su sistema vascular
Hay diferentes fijadores, como el formaldehido, glutaraldehido, y otros como el tetraóxido de osmio etc.
El estudio de la morfologia se hace en celulas muertas fijadas de manera que mantienen su estructura como si estuvieran vivas , para ello se realiza la fijacionde las proteínas para detener la actividad celular protegiendo las células de un ataque bacteriano o putrefacción y preparar los tejidos para procedimientos histológicos posteriores.
Los métodos de fijación pueden ser físicos o químicos . El físico consiste en cambios rapidos de temperaturas , con calor y por congelación inmediata sumergiendo el tejido en nitrógeno liquido dejando el tejidolisto para cortar con un micrótomo.
Los métodos químicos consisten en exponer el tejido a agentes químicos para provocar la formación de puentes transversales de unión entre moléculas adyacentes de proteínas tisulares .Los agentes químicos en microscopia óptica mas utilizados en microscopia óptica son el formaldehido 5% , formol 10% o liquidos como de Bouin o Helly . En microscopia electrónica elfijador mas empleado es glutaraldehido y el tetraoxido de osmio. Se emplean dos tipos de las técnicas para fijación química la técnica de perfusión y la técnica de inmersión.En la primera se coloca el fijador en una jeringuilla y se inyecta en el torrente sanguíneo del animal de manera que se distribuya por todo el organismo , una vez fijado podemos disecarlo para obtener el órgano de interés . Enla técnica de inmersión se cortan tubos de tejido se identifican , se colocan en un recipiente de plástico y se pasan a un recipiente con fijador . Se utiliza un volumen de fijador 50 veces mayor al tamaño de la muestra y mantenerla en el fijador de 1 a 24 h. Se cortan en delgadas rebanadas , antes de este paso se necesita uno previo ya que el alto contenido en agua dificulta el proceso para...
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