Filosofia

Artículos originales

Detección y tipificación del virus del papiloma humano (VPH) en mujeres con cáncer de cuello uterino en Bogotá y Barranquilla. Procedimientos técnicos y de diagnóstico
Detection and Typing of the Human Papilloma Virus in Women with Cervical Cancer in Bogotá and Barranquilla. Technical and Diagnostic Procedures
Mónica Molano1, Raúl Murillo2, Arlenne Cano2, Óscar Gamboa2,Jaime Ardila2, Juan Carlos Mejía3, Gilberto Martínez4
1 2 3 4 Grupo de Investigación en Biología del Cáncer, Instituto Nacional de Cancerología, Bogotá. Colombia. Subdirección de Investigaciones, Instituto Nacional de Cancerología, Bogotá. Colombia. Grupo de Patología, Instituto Nacional de Cancerología, Bogotá. Colombia. Grupo de Ginecología, Clínica del Country, Bogotá. Colombia.

ResumenObjetivo: Analizar los procedimientos técnicos y de diagnóstico en la detección de genotipos del virus del papiloma humano (VPH) en muestras con cáncer de cuello uterino. Métodos: Se tomaron tejidos incluidos en parafina de 268 casos de cáncer de cuello uterino, procedentes de Barranquilla y Bogotá. Se verificó el diagnóstico histológico mediante nuevos cortes y se analizó la calidad de las muestrasmediante amplificación del gen de B-globina. En muestras B-globina negativas se realizaron nuevos cortes y nueva amplificación. La detección de VPH se realizó mediante iniciadores GP5+/GP6+biodirigidos hacia la región L1, y tipificación mediante EIA y RLB. En las muestras negativas para GP5+/GP6+ se desarrollaron PCR tipo específicas hacia la región E7 de 14 tipos de VPH de alto riesgo.Resultados: De las 268 muestras iniciales, 20 (7,46%) tuvieron diagnóstico histológico inadecuado; 55/248 muestras fueron inicialmente B-globina negativas, pero 29 se recuperaron con una segunda PCR realizada, dejando 26 B-globina negativas (10,5%). Se detectó VPH en 210/222 muestras adecuadas mediante GP5+/GP6+ (94,6%), y en 7 muestras adicionales (3,15%), mediante iniciadores dirigidos hacia E7. No sedetectó infección en 2,25% de los casos. Se encontraron 24 tipos de VPH; los más prevalentes fueron el VPH-16 (50,9%), VPH-18 (12,7%), VPH-45 (8,8%), VPH-31 (6,5%) y VPH-58 (6,0%). Hubo un 16,6% de infecciones múltiples. Conclusión: El adecuado procesamiento y diagnóstico de las muestras y el uso de pruebas combinadas hacia las regiones L1 y E7 permiten una estimación óptima de la prevalencia de lainfección en muestras incluidas en parafina. Palabras clave: VPH, tipificación del ADN, neoplasias del cuello uterino, técnicas moleculares diagnósticas, Colombia.

Correspondencia: Mónica Molano Luque. Instituto Nacional de Cancerología. Av. 1ª No. 9-85. Bogotá, Colombia. Tel.: +571-3341111 ext. 4205. Correo electrónico: mmolano@cancer.gov.co Fecha de recepción: 23 de febrero del 2009. Fecha deaprobación: 23 de febrero del 2010.

78 Rev Colomb CanCeRol 2010;14(2):78-87

móniCa molano, Raúl muRillo, aRlenne Cano, ósCaR gamboa, jaime aRdila, juan CaRlos mejía, gilbeRto maRtínez

Abstract
Objective: To analyze the role played by technical and diagnostic techniques in the detection of diverse genotypes of the human papilloma virus (HPV) in cervical cancer samples. Methods: Paraffinfixed tissue samples were taken from 268 cases of cervical cancer in Bogotá and Barranquilla. Histological diagnosis was verified through new cuts and sample quality was analyzed through amplification of the β-globin gene. In the case of β-globin negatives, additional cuts and amplification were carried out. HPV detection was achieved using GP5+/GP6+bio indicators directed towards the L1 region,and typing through EIA and RLB. Among GP5+/GP6+ negatives, specific PCR type was developed towards the E7 region of 14 types of high risk HPV. Results: Out of the initial 268 samples, 20 (7.46%) had inadequate histological diagnosis. Initially β-globin negative samples came to 55/248, but 29 recuperated with the realization of a second PCR, resulting in 26 β-globin negatives (10.5%). HPV was...