Fish (Hibridacion Fluorescente In Situ)
Páginas: 3 (648 palabras)
Publicado: 11 de diciembre de 2012
FISH (HIBRIDACION FLUORESCENTE IN SITU)
Breve reseña histórica
La técnica fue desarrollada en 1969 por Gall y Pardue e independientemente por Jonh et al., en el mismo año. Gall ycolaboradores describieron una técnica que formaba híbridos moleculares entre RNA y DNA. La técnica se llevó a cabo en ovocitos de Xenopus laevis, hibridando rRNA con rDNA extracromosomal.Detectaron la localización diferencial en las células, de los híbridos de ácidos nucléicos ha distintos estadíos. En ese momento la única forma de marcaje eran los radioisótopos, por lo que se usótritio para el experimento y la forma de detección fue por autoradiografía. Demostraron que en ciertas partes como tejido conectivo, la técnica no era suficientemente sensible para mostrar lascantidades pequeñas de rDNA en un genoma. Esto lo llevaron a cabo exponiendo las preparaciones por periodos más allá de dos meses. Evaluaron variables de la técnica que afectan el rendimiento de lahibridación, haciéndo hincapié en un paso fundamental que se debe llevar a cabo para realizar la técnica: la desnaturalización. Plantearon que el híbrido puede reabsorberse en el soporte que utilizaron(agar) y esto puede fungir como impedimento para que se lleve a cabo la reacción.
Hibridación in situ es una técnica que detecta secuencias de ácidos nucleicos en células, cromosomas o tejidospreservados. La detección in situ provee una visualización directa de la localización espacial de secuencias específicas que es crucial para dilucidar la organización y función génica, porlo que el método de hibridación in situ se ha convertido en una técnica importante en diversos campos, incluyendo diagnóstico de rearreglos cromosomales, detección de infecciones virales yanálisis de la función génica durante el desarrollo embrionario.
La hibridación in situ toma como fundamento la complementaridad de los ácidos nucléicos, la cual puede ser DNA y/o RNA, a través...
Breve reseña histórica
La técnica fue desarrollada en 1969 por Gall y Pardue e independientemente por Jonh et al., en el mismo año. Gall ycolaboradores describieron una técnica que formaba híbridos moleculares entre RNA y DNA. La técnica se llevó a cabo en ovocitos de Xenopus laevis, hibridando rRNA con rDNA extracromosomal.Detectaron la localización diferencial en las células, de los híbridos de ácidos nucléicos ha distintos estadíos. En ese momento la única forma de marcaje eran los radioisótopos, por lo que se usótritio para el experimento y la forma de detección fue por autoradiografía. Demostraron que en ciertas partes como tejido conectivo, la técnica no era suficientemente sensible para mostrar lascantidades pequeñas de rDNA en un genoma. Esto lo llevaron a cabo exponiendo las preparaciones por periodos más allá de dos meses. Evaluaron variables de la técnica que afectan el rendimiento de lahibridación, haciéndo hincapié en un paso fundamental que se debe llevar a cabo para realizar la técnica: la desnaturalización. Plantearon que el híbrido puede reabsorberse en el soporte que utilizaron(agar) y esto puede fungir como impedimento para que se lleve a cabo la reacción.
Hibridación in situ es una técnica que detecta secuencias de ácidos nucleicos en células, cromosomas o tejidospreservados. La detección in situ provee una visualización directa de la localización espacial de secuencias específicas que es crucial para dilucidar la organización y función génica, porlo que el método de hibridación in situ se ha convertido en una técnica importante en diversos campos, incluyendo diagnóstico de rearreglos cromosomales, detección de infecciones virales yanálisis de la función génica durante el desarrollo embrionario.
La hibridación in situ toma como fundamento la complementaridad de los ácidos nucléicos, la cual puede ser DNA y/o RNA, a través...
Leer documento completo
Regístrate para leer el documento completo.