fisiologia

La espectrofotometría UV-visible es una técnica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. Se basa en que las moléculas absorben las radiaciones electromagnéticas

Agregamos (KMnO4 ) a los cuatro tubo en proporciones distintas


Tubo 1 tubo 2 tubo 3 tubo 4 Tubo 5 Tubo 6
0,5ml 1,5 2,5 3,5 desconocido desconocido
9,5 8,5 7,5 6,5
10 10 10 10Realizamos la dilución ( KMnO4) con agua hasta 10 mml, tendremos el estándar


















400 0,293
420 0,77
440 0,183
460 0.55
480 1,148
500 1,142
520 1,513
540 1,528
560 1,490
580 1,037
600 0,472
620 0,355
640 0,303
660 0,238
680 0,179
700 0,144




















Escogemos el que tiene mayorlongitud de onda y volvemos a calibrar a cero con el agua, para después marcar 540nm . y continuar con la lectura

Tubo 1 tubo 2 tubo 3 tubo 4 Tubo 5 Tubo 6
540 540 540 540 540 540
0,231 0,652 0,987 1.172 0,769 0,392






Tubo N° 1 0,5 ml de

40mg -------------------- 100ml
X -------------------- 0,5ml
X=0,2mg/ml

Tubo N° 2 2,5ml

40mg-------------------- 100ml
X -------------------- 2,5ml
X=1mg/ml


Tubo N°4 1,5ml

40mg -------------------- 100ml
X -------------------- 1,5ml
X=0,6mg/ml


Tubo N°3 3,5ml

40mg -------------------- 100ml
X -------------------- 3,5ml
X=1,4mg/ml



Tubo N° 5 desconocido
Para A

0.652 =0,769
0.6 A

A= 0,707mg





Tubo N°6Desconocido


0.232 =0,392
0.2 A

A= 0,337mg








El fundamento de la espectroscopía se debe a la capacidad de las moléculas para absorber radiaciones, entre ellas las radiaciones dentro del espectro UV-visible. Las longitudes de onda de las radiaciones que una molécula puede absorber y la eficiencia con la que se absorben dependen de la estructura atómica y de lascondiciones del medio (pH, temperatura, fuerza iónica, constante dieléctrica), por lo que dicha técnica constituye un valioso instrumento para la determinación y caracterización de biomoléculas.


Figura 1. Diagrama de niveles de energía en una molécula. La absorción de energía luminosa hace que la molécula pase desde un estado fundamental (E1) a otro excitado (E2). Posteriormente la molécularelaja su energía mediante distintos mecanismos (vibración, rotación, etc.)



En espectofotometría de absorbancia se utilizan las regiones del ultravioleta (UV cercano, de 195-400 nm) y el visible (400-780 nm).













Se basan en la absorción de luz visible o de otro tipo de energía radiante por una solución, la cantidad de energía radiante absorbida es proporcional a laconcentración del material en la solución q realiza la absorción midiendo la absorción de la luz o de otro tipo deenergía radiante es posible determinar cuantitativamente la cantidad de sustancias absorbentes presentes.
http://es.scribd.com/doc/23620266/Espectrofotometria-Del-Visible-y-Ultraviolet-A

Fotocolorímetro
El fotocolorímetro es una variedad de colorímetro (medidor de color). Es uninstrumento usado en las Química para determinar la concentración de sustancias disueltas en líquidos o sólidos mientras sean transparentes a la luz visible, ultravioleta o infrarroja, midiendo y comparando sus colores. La ciencia o arte de su uso se denomina fotocolorimetría y está regida por leyes físicas muy estudiadas. Para ello se introduce en el aparato un testigo o patrón con una concentraciónde sustancia conocida y la muestra a determinar. Se mide la cantidad de color de cada uno y según su relación, se determina la concentración de la muestra(concentración es la cantidad de sustancia disuelta en un volumen determinado de solvente).
El aparato consta de un sistema lumínico para iluminar las muestras y se mide con un sistema electrónico la cantidad de luz que pasa. Esa luz debe ser...