FISIOLOGICA

1A: Hipótesis nula: El tratamiento ha lesionado las neuronas del hipótalamo donde se origina HCM y/o orexina en una varias zonas: en cápsula interna, zona incierta, HL, trígono cerebral, 3v, y/otracto mamilotalámico. Hipotesis alternativa: El tratamiento no lesiona las neuronas del hipotálamo en las zonas indicadas anteriormente
1B: Diseño experimental de dos grupos con medida pre ypostratamiento.
Variable Independiente: tratamiento administrado, niveles: con y sin tratamiento
Variable Dependiente: lesión de las neuronas hipotalámicas en las zonas indicadas en el apartado 1A; grupode control: sin tratamiento; grupo experimental: con tratamiento; muestra de 30 ratas Winstar machos adultas obtenidas de laboratorios de la UNED, sanas, seleccionadas aleatoriamente y asignadasequivalentemente a cada grupo. De la muestra experimental tomaremos 5 ratas que presenten los síntomas de conducta de ingesta inhibida post tratamiento y analizaremos sus hipotálamos. Las técnicasutilizadas para aceptar o rechazar la Hipótesis nula son: Anestesia previa en ratas, perfusión, fijacción, sección del encéfalo y tinción de las secciones. Para la fijación se realiza una perfusión delsistema circulatorio con una solución salina de NaCl y posteriormente se introducen los encéfalos en fijador (formol) durante 2 o 4 horas. Después los sumergimos en sacarosa al 30% p/v toda la noche.Utilizaremos cortes flotantes de muestras fijadas por perfusión que nos permitan seleccionar el hipotálamo. La obtención de estos cortes flotantes la realizaremos a través de un micrótomo con unaccesorio criostático que congele la muestra para su mejor sección (isopentano a -160ºC). Para protegerlo (crioprotección) utilizaremos sacarosa entre el 10 y el 30% en solución de buffer fosfato salino con0,01% de azida sódica. Una vez obtengamos las secciones las tintaremos con violeta de cresilo. Los cortes se analizan con microscopio confocal con láser.

3. Hipótesis nula: La melatonina o...