Fluorescencia para determinacion de proteinas

INDICE
CAPIRULO I
* Objetivos, fundamento teórico ………………4
CAPITULO II
* Métodos…………………………………………..7
CAPITULO III
* Aportes ………………………………………….10
CAPITULO IV
* Justificación …………………………………….14
CAPUTULO V
* Discusión ………………………………………17
CAPITULO VI
* Conclusiones ………………………………….20

INTRODUCCION
 
La fluorescencia es un proceso de emisión en el cual las moléculas sonexcitadas por la absorción de radiación electromagnética. Las especies excitadas se relajan al estado fundamental, liberando su exceso de energía en forma de fotones. Una de las características más atractivas de los métodos de fluorescencia es su sensibilidad inherente, la cual es, con frecuencia, de uno a tres ordenes de magnitud mejor que las de la Espectroscopía de absorción. No obstante, losmétodos de fluorescencia se aplican mucho menos que los métodos de absorción debido al número relativamente limitado de sistemas químicos que se pueden hacer fluorescer.
 La fluorescencia en las proteínas es una herramienta útil para dar información de su estructura da a conocer la estructura de la proteína nativa, relacionar estructura con su actividad, su función y también ayuda a detectar cambiosde estructura, que pueden llegar a alterar su función; también nos da a conocer información de la Dinámica al interaccionar con otras macromoléculas o con ligandos.







CAPITULO I
OBJETIVOS, FUNDAMENTO TEORICO





"El retirarse no es huir, ni el esperar es cordura,
cuando el peligro sobrepuja a la esperanza."
Miguel de Cervantes SaabedraFLUORESCENCIA PARA DETERMINACION DE PROTEINAS

OBJETIVOS
* Conocer el proceso de fluorescencia para determinación de proteínas
* Conocer la estructura, actividad y cambios de la proteína mediante el método de fluorescencia

FUNDAMENTO TEORICO
De todos los compuestos nitrogenados en los alimentos, la parte más importante desde el punto de vista nutricional proteínas
El términoprótidos incluye:
* Proteínas
* Péptidos
* Aminoácidos
Importancia
_ Nutricional (aminoácidos esenciales)
_ Propiedades organolépticas y de textura en productos agroalimentarios y de origen animal
_ Control de calidad: alergías a ciertas proteínas (gluten)
_Punto de vista de análisis de alimentos evaluación del contenido total de proteínas = principal interés
_La mayor parte delos procedimientos de determinación de proteína total se basan en la determinación del nitrógeno procedimientos de cálculo empíricos aproximados.

Determinación de proteínas por absorción ultravioleta:
Las proteínas presentan un máximo de absorción de luz ultravioleta a una longitud de onda de 280 nm, debida fundamentalmente a la presencia de los aminoácidos tirosina, triptófano yfenilalanina.
Este método fue usado por Warburg y Christian (1941), como una medida rápida y bastante sensible de la concentración de proteína. Sin embargo, los ácidos nucleicos presentes frecuentemente en las preparaciones enzimáticas muestran un máximo de absorción a 260 nm que solapa parcialmente con el de las proteínas. Mediante una serie de cálculos matemáticos estos autores, tratando de eliminar lainterferencia de los ácidos nucleicos, llegan a la siguiente ecuación:
Concentración de proteína (mg/ml) = 1,55A280nm - 0,76A260nm
A pesar de que al método se le pueden observar algunos inconvenientes, presenta las ventajas de su sencillez y rapidez en las determinaciones, así como su utilización con pequeños volúmenes de muestra.

CAPITULO II
METODOS

“Todas las teorías son legítimas yninguna tiene importancia.
Lo que importa es lo que se hace con ellas.”
Jorge Luis Borges

METODOS
-Determinación de proteínas por absorción ultravioleta:
Las proteínas presentan un máximo de absorción de luz ultravioleta a una longitud de onda de 280 nm, debida fundamentalmente a la presencia de los aminoácidos tirosina, triptófano y fenilalanina.
Este método fue usado por Warburg y...