formacion y orientacion laboral

. Métodos para la cuantificación de proteínas
Emilio Fernández Rey
es y
Aurora Galván Cejudo
Dep
a
rtam
ent
o de Bioquím
i
ca y Biolo
g
ía Molecula
r, Cam
pus Uni
v
e
r
sita
rio deRa
banal
es,
Edificio Severo Och
oa, 140
71-Có
rdo
ba
RESUME
N
En esta práctica se utilizaran
tres mé
todos para la cuantificación de
proteínas: Biuret, Brad
ford y BCA. Para cada
unode los métodos se
realizaran: una curva estándar, el cálcu
lo del coeficiente de extinción y
el
rango de sensibilid
ad. Se realizará
la cuantificación de dos muestras
problemas de baja y altaconcentraci
ón, respectivamente, y se discut
i
rá
las ventajas e inconvenientes de cada uno de los métodos.
Palabras clave:
cuantificación de proteínas
, Biuret, Bradford, BCA
Abreviaturas:BCA: ácido bicinc
onínico
1. INTRODUCCIÓN Y
OBJETIVOS
1.1
Métodos para la cuantificación de proteínas: ventajas e
inconvenientes
Determinar la concentración de proteí
nas en una muestrabiológica es una
técnica de rutina bás
ica cuando se abor
da un esquema de
purific
ación de una
proteína concreta, cuando se quiere cono
cer la actividad específica de una
preparación enz
imática,par
a el diagnóstic
o
de enf
ermedades, así como para
otros muchos propósitos.
Existen diferentes métodos par
a la c
uantif
icación de prot
eínas. Muchos de
estos métodos se bas
an en: a) lapropied
ad intrínseca de las pr
oteínas para
absorber luz en el UV, b) para la fo
rmación de derivados quí
micos, o c
)
la
capacidad que tienen las proteí
nas de unir ciertos color
antes.En la Tabla I se
recogen los métodos más usados así co
mo sus respectivas sensibilidades.
Cada uno de estos métodos tiene sus ventajas e inconvenientes, las
principales se recogen en la Tabla II.1
-
Decide qué método de determinación
de proteínas eleg
irías para la
cuantificación de proteínas en: s
uero, orina, LCR, durante una
purificación enzimátic
a, en un extr
acto bacteriano...