Formato de consentimiento informado

FORMULARIO DE CONSENTIMIENTO INFORMADO
TÍTULO: INGENIERO BIOMÉDICO.
PROTOCOLO No: 00001.
INVESTIGADOR: ¿??????
DIRECCIÓN: ¿???????
INTRODUCCIÓN: El investigador que conducen esta investigación ha
determinado que Ud. reúne los requisitos principales para participar en el
estudio. La siguiente información describe el estudio y su función como
participante en el estudio. Cualquier preguntaque tenga acerca de este
formulario de consentimiento informado y/o del estudio, aclararla con el
personal idóneo que coordina esta practica. Por favor, lea detenidamente este
documento y no dude en consultar al personal sobre cualquier pregunta que
tenga acerca del estudio y/o la información provista a continuación. No pueden
asegurarse ni garantizarse los resultados del estudio.
OBJETIVODEL ESTUDIO: En este estudio se determinará la viabilidad celular
de la sangre que Ud. ofrece como muestra para los estudios de evaluación de
material Si-DLC, W-DLC, Ti, Fe y AISI-316 en la prueba de citotoxicidad para
análisis cualitativo de biocompatibilidad.
Luego de haber sido asignado a participar en el estudio, Ud. estará expuesto a
una extracción de sangre por parte del personalcalificado, la cual será
depositada y almacenada luego para su previa conservación.
DESCRIPCIÓN DEL ESTUDIO Y PROCEDIMIENTOS: La muestra de material
sanguíneo del estudio será extraída, marcada y manipulada únicamente por la
persona que ha sido asignado para tal fin.


EXTRACCIÓN DE SANGRE PERIFÉRICA POR VENOPUNCIÓN:

Obtener 10ml de sangre por venopunción, previo consentimiento informado deldonante de la muestra; se debe tener en cuenta que el donante no debe
presentar alguna enfermedad infecciosa o contagiosa que active el sistema
inmune dentro de los 60 días previos.

PREPARACIÓN DE MUESTRAS DESPUÉS DE CENTRIFUGACIÓN
(SEPARACIÓN Y LAVADOS):
En un tubo de 20ml colocar 10ml de histopaque marca Sigma-Aldrich ref. 1077
y luego añadir en la superficie del histopaque los 10ml desangre periférica
obtenidos. Centrifugar los tubos a 400 gravedades durante 30 minutos a
temperatura ambiente (27°C) con el objetivo de separar los linfocitos.

Extraer con una micropipeta el anillo de células (linfocitos) que queda en la
interface entre el suero y el histopaque del tubo (aproximadamente 800µl),
tratando de arrastrar la menor cantidad posible del reactivo.
Añadir a cadatubo 3800µl de medio de cultivo RPMI 1640 enriquecido, con 5%
de suero fetal bovino equivalente a 190µl; realizar una disociación (mezclar los
linfocitos de forma homogénea con el medio) para luego llevar a un primer
lavado en centrifugadora a 250 gravedades (2.190rpm), por 10 minutos a 27°C.
Retirar el sobrenadante de cada uno de los tubos eppendorf y realizar un
segundo lavado encentrifugadora con las mismas especificaciones que el
primero.


PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA CONTEOS PRE Y POS:

Retirar el material precipitado (linfocitos) en cada tubo eppendorf. Preparar una
solución compuesta de 20ml de RPMI 1640 suplementado con suero bovino
fetal al 10% que equivale a 2ml, penicilina 50µg/ml equivalente a 1000µl y
gentamicina 10µg/ml que equivale a 200µl; esta solución sedivide por igual en
el numero de muestras que se requiera, luego se disocia nuevamente la
cantidad de linfocitos agregada junto con la solución para iniciar el primer
conteo.
Se hace la extracción de 100µl del cultivo y se mezclan en un tubo eppendorf
que contiene 100µl de azul de tripán al 4% dejándolos reposar durante 5min
máximo (el azul de tripán se prepara con 100ml de agua autoclavada por30min, agregando 0.04g de azul de tripán en polvo); se retira una cantidad
adecuada de la mezcla del cultivo con el tinte, y se coloca en la cámara de
newbauer con la micropipeta por ambas matrices de evaluación, para proceder
al conteo con el microscopio en escalas 40X y 100X, centrándose en los
recuadros de las esquinas de la matriz.
Posteriormente el cultivo que se está incubando en la...