Fosfatasa acida en suero
Páginas: 7 (1622 palabras)
Publicado: 29 de abril de 2010
[pic]POINTE SCIENTIFIC FOSFATASA ACIDA
REACTIVO PARA FOSFATASA ACIDA
USO:
Para la determinación cuantitativa de Fosfatasa Acida en suero.
HISTORIA DEL METODO:
Los compuestos fosfatados propuestos a través de los años como substratos para medir la actividad de la Fosfatasa Acida incluyen Fenilfosfatos, a-glicerolfosfato, p-Nitrofenilfosfato y Timolftaleinafosfato. La mayoria de los substratos fueron insensibles a pequeños aumentos en la actividad de Fosfatasa Acida Prostática, o eran muy sensibles a la Fosfatasa Acida No Prostática en el suero. Roy et al(1) propuso un método utilizando Monofosfato sodico de Timolftaleina como substrato específico para Fosfatasa Acida Prostática en 1971.Una modificación por Ewen y Spitzer en 1976 mejoró lasensibilidad del método de Roy.
Aunque el procedimiento modificado ha sido aceptado, es un largo y tedioso procedimiento y no es totalmente específico para la Fosfatasa Acida medida en eritrocitos y plaquetas, en 1959 Babson propuso el Alfa - naftilfosfato como substrato específico para Fosfatasa Acida Prostática su especifidad fué disputada por Amador en 1969.
Hillman propuso un método en 1971 queincluía 2 Amino 5 Clorotolueno Diazotizado (rojo rápido) que forman un compuesto diácido que absorbía a 405 nm. L-Tartrato fué usado como un inhibidor específico de Fosfatasa Acida Prostática para establecer diferencialmente la cantidad de Isoenzima Prostática. Este método cinético es específico, rápido, simple y puede ser adaptado facilmente a instrumentos automatizados.
PRINCIPIO:A-Naftilfosfato es hidrolizado por la Fosfatasa Acida del suero a a-naftol y fosfato inorganico. El rango de hidrólisis es proporcional a la actividad de la enzima presente.
El A-Naftol producido es unido al rojo rápido para producir un complejo coloreado que absorbe a 405 nm. la reacción puede ser cuantitativa fotometrica ya que la reacción es instantanea.
L-Tartrato inhibe la Fosfatsa AcidaProstática pero no interfiere con el macanismo de reacción . Por lo tanto la prueba se hace en presencia y/o ausencia del tartrato. la diferencia entre los resultados es el nivel de Fosfa-tasa Acida Prostática en suero.
SIGNIFICADO CLINICO:
Los niveles elevados de Fosfatasa Acida Prostática se encuentran en casos de cancer metastasico de próstata. Ya que la Fosfatasa Acida tambien se produce en otrostejidos , la isoenzima prostática puede ser distinguida de la no prostática por diagnóstico preciso. Los niveles elevados de Fosfatasa Acida No-Prostática se han observado en pacientes con el mal de Paget's, Hiperparatiroidismo con participación esquelética y cancer que ha invadido los huesos.
REACTIVOS:
1. Reactivo Fosfatasa Acida: La concentración se refiere al reactivo Nafthlfosfato 3mM.Rojo rápido lt 1mM, Acido cítrico 20 mM. CItrato de Sodio 10 mM. PH 5.3 [pic] 0.1.
2. Reactivo L-Tartrato (la concentración se refiere al reactivo reconstituido): L-Tartrato de Sodio 2 mM. Acido Cítrico 70 mM, Citrato de Sodio 10 mM. PH 5.3 [pic] 0.1
3. Buffer de Acetato: 5M. PH 5.0
PRECAUCIONES:
1. Este reactivo es para uso "In Vitro" solamente.
PREPARACION DEL REACTIVO:
1. Reconstituyael reactivo de Fosfatasa Acida con el volúmen de agua destilada indicado en la etiqueta. Agite para disolver.
2. Reconstituya el reactivo L-Tartrato con 5.0 ml. de agua destilada, agite el reactivo para ayudar a disolver si es necesario.
3. El buffer de Acetato, esta listo para usarse.
ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO:
1. Los viales cerrados son estables hasta la fecha de expiración indicada enla etiqueta del vial refrigerados (2-8)oC.
2. El reactivo de Fosfatasa Acida es estable 24 hrs. a temperatura ambiente (22-28oC) y por 14 días si se refrigera (2-8oC)
3. El reactivo reconstituido de L-Tartrato es estable refrigerado (2-8oC) hasta la fecha de expiración indicada en la etiqueta . Si ocurre cristalización , caliente a temperatura moderada (40-50 oC) hasta disolver.
4. El buffer...
REACTIVO PARA FOSFATASA ACIDA
USO:
Para la determinación cuantitativa de Fosfatasa Acida en suero.
HISTORIA DEL METODO:
Los compuestos fosfatados propuestos a través de los años como substratos para medir la actividad de la Fosfatasa Acida incluyen Fenilfosfatos, a-glicerolfosfato, p-Nitrofenilfosfato y Timolftaleinafosfato. La mayoria de los substratos fueron insensibles a pequeños aumentos en la actividad de Fosfatasa Acida Prostática, o eran muy sensibles a la Fosfatasa Acida No Prostática en el suero. Roy et al(1) propuso un método utilizando Monofosfato sodico de Timolftaleina como substrato específico para Fosfatasa Acida Prostática en 1971.Una modificación por Ewen y Spitzer en 1976 mejoró lasensibilidad del método de Roy.
Aunque el procedimiento modificado ha sido aceptado, es un largo y tedioso procedimiento y no es totalmente específico para la Fosfatasa Acida medida en eritrocitos y plaquetas, en 1959 Babson propuso el Alfa - naftilfosfato como substrato específico para Fosfatasa Acida Prostática su especifidad fué disputada por Amador en 1969.
Hillman propuso un método en 1971 queincluía 2 Amino 5 Clorotolueno Diazotizado (rojo rápido) que forman un compuesto diácido que absorbía a 405 nm. L-Tartrato fué usado como un inhibidor específico de Fosfatasa Acida Prostática para establecer diferencialmente la cantidad de Isoenzima Prostática. Este método cinético es específico, rápido, simple y puede ser adaptado facilmente a instrumentos automatizados.
PRINCIPIO:A-Naftilfosfato es hidrolizado por la Fosfatasa Acida del suero a a-naftol y fosfato inorganico. El rango de hidrólisis es proporcional a la actividad de la enzima presente.
El A-Naftol producido es unido al rojo rápido para producir un complejo coloreado que absorbe a 405 nm. la reacción puede ser cuantitativa fotometrica ya que la reacción es instantanea.
L-Tartrato inhibe la Fosfatsa AcidaProstática pero no interfiere con el macanismo de reacción . Por lo tanto la prueba se hace en presencia y/o ausencia del tartrato. la diferencia entre los resultados es el nivel de Fosfa-tasa Acida Prostática en suero.
SIGNIFICADO CLINICO:
Los niveles elevados de Fosfatasa Acida Prostática se encuentran en casos de cancer metastasico de próstata. Ya que la Fosfatasa Acida tambien se produce en otrostejidos , la isoenzima prostática puede ser distinguida de la no prostática por diagnóstico preciso. Los niveles elevados de Fosfatasa Acida No-Prostática se han observado en pacientes con el mal de Paget's, Hiperparatiroidismo con participación esquelética y cancer que ha invadido los huesos.
REACTIVOS:
1. Reactivo Fosfatasa Acida: La concentración se refiere al reactivo Nafthlfosfato 3mM.Rojo rápido lt 1mM, Acido cítrico 20 mM. CItrato de Sodio 10 mM. PH 5.3 [pic] 0.1.
2. Reactivo L-Tartrato (la concentración se refiere al reactivo reconstituido): L-Tartrato de Sodio 2 mM. Acido Cítrico 70 mM, Citrato de Sodio 10 mM. PH 5.3 [pic] 0.1
3. Buffer de Acetato: 5M. PH 5.0
PRECAUCIONES:
1. Este reactivo es para uso "In Vitro" solamente.
PREPARACION DEL REACTIVO:
1. Reconstituyael reactivo de Fosfatasa Acida con el volúmen de agua destilada indicado en la etiqueta. Agite para disolver.
2. Reconstituya el reactivo L-Tartrato con 5.0 ml. de agua destilada, agite el reactivo para ayudar a disolver si es necesario.
3. El buffer de Acetato, esta listo para usarse.
ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO:
1. Los viales cerrados son estables hasta la fecha de expiración indicada enla etiqueta del vial refrigerados (2-8)oC.
2. El reactivo de Fosfatasa Acida es estable 24 hrs. a temperatura ambiente (22-28oC) y por 14 días si se refrigera (2-8oC)
3. El reactivo reconstituido de L-Tartrato es estable refrigerado (2-8oC) hasta la fecha de expiración indicada en la etiqueta . Si ocurre cristalización , caliente a temperatura moderada (40-50 oC) hasta disolver.
4. El buffer...
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