Fosfatasa

PONTIFICIA UNIVERSIDAD CATOLICA DE CHILE
FACULTAD DE QUIMICA
DEPARTAMENTO DE QUIMICA FISICA

PROPUESTA TRABAJO EXPERIMENTAL LABORATORIO BIOQUIMICA QIM-117

ENZIMAS, FOSFATASA ACIDA
OBJETIVOGENERAL: Caracterizar la cinética enzimática de la fosfatasa acida.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
1. Determinar el efecto del p H en la reacción enzimática de la fosfatasa acida.
2. Determinar el efecto dela temperatura en la reacción enzimática de la fosfatasa ácida.
3. Estudiar el efecto de la concentración del sustrato en la reacción enzimática de la fosfatasa acida.
4. Determinar el efecto de uninhibidor en la cinética de la reacción de la fosfatasa acida.
FUNDAMENTOS
Los organismos vivos pueden obtener y gastar la energía muy eficientemente debido a la presencia de catalizadores orgánicosllamados enzimas. Como sucede con los catalizadores inorgánicos, las enzimas modifican la velocidad de una reacción química sin alterar el equilibrio final de la reacción que catalizan; además serequieren pequeñas cantidades de enzima para transformar un gran número de moléculas de sustrato. Sin embargo a diferencia de la mayoría de los catalizadores inorgánicos las enzimas son bastanteespecíficas, ya que catalizan un número comparativamente pequeños de reacciones y en algunos casos tan solo una reacción. Por otro lado, las enzimas funcionan solamente bajo condiciones muy definidas de pH,temperatura, concentración de sustrato, cofactores, etc. Para controlar y mantener las mejores condiciones (óptimas) en el caso del pH se utilizan soluciones amortiguadoras, las cuales evitan loscambios bruscos del pH que se puedan producir por efecto de la actividad enzimática. La temperatura se mantiene constante incubando el ensayo enzimático en baños termorregulados. Para determinar conexactitud la actividad de una enzima, es necesario conocer muy bien cuál es la reacción que esta cataliza, el o los sustratos y el o los productos de dicha reacción. Además se debe disponer de los métodos...