Fotometria

Fotometría
Introducción
​La fotometría o espectrofotometría es una técnica bioquímica utilizada para determinar la concentración de diversas sustancias .La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidaddesconocida de soluto y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.
Todas las sustancias pueden absorber energía radiante, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la región del infrarrojo. La absorción de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de laestructura de las moléculas, y es característica para cada sustancia química. Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; laenergía radiante no puede producir ningún efecto sin ser absorbida. El color de las sustancias se debe a que éstas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes deonda no absorbida.
La espectrofotometría usa la luz del espectro electromagnético y usa radiaciones del campo ultravioleta principalmente de 200 a 400 nm y usa la luz visible de 400 a 800 nm, por lo que es de gran utilidad para caracterizar las soluciones en la región ultravioleta visible del espectro.

La Fotometría, por ejemplo, es una de las técnicas más usadas en Bioquímica; consistefundamentalmente en la medición de la luz. En otras palabras, sirve para determinar la
concentración de una molécula o grupo de moléculas presentes en una mezcla. La ventaja
más relevante es que no necesita aislar el compuesto para determinar su presencia.

FOTOMETRO
    Técnicamente el fotómetro mide la cantidad de luz que incide o es reflejada por el sujeto, dando así las combinacionescorrectas de diafragma y velocidad para lograr la fotografía perfecta. Muchas cámaras actualmente viene con un fotómetro incorporado cuya información se puede ver fácilmente en el visor. 
    Se tiene que tener en consideración que el fotómetro de la cámara puede también equivocarse cuando se enfrente a escenas muy contrastadas o con temas mucho más claros o oscuros de lo normal. Artísticamente su errorpuede consistir en no avisar cuando debe reducir la exposición para conseguir una silueta o una atmósfera de tristeza o aumentarla para darle vivacidad a los colores. Incluso los mejores exposímetros carecen de gusto artístico.

    Los errores de exposición aparecen más evidentes en las diapositivas. A diferencia de las copias positivas, no pasan por una fase de positivado en la que puedancompensarse. 
    ¿Qué combinación de diafragma y velocidad debemos escoger? La decisión tendrá que basarse de acuerdo a cuatro posibles condiciones: velocidad rápida para "congelar" la acción o evitar los movimientos de la cámara, velocidad lenta para difuminar la imagen, abertura de diafragma pequeña para aumentar la profundidad de campo y abertura grande para enfocar selectivamente (primerosplanos). 
    Las escalas de velocidad y diafragma están graduadas de forma que cada valor da el doble de exposición que es el valor inmediato inferior y la mitad de inmediato superior. Pasar de f/8 a f/5,6 , significa doblar la cantidad de luz, lo mismo que pasar de 250 a 125 de velocidad. 
    La exposición que se da a la película puede ser calificada como:
a) Subexposición
    Que quiere decirque no llega suficiente luz a la película. Las altas luces pierden brillantez y las sombras pierden detalle.
b) Exposición correcta
    Con una exposición correcta, llega a la película suficiente luz para mostrar los detalles, no sólo de las sombras sino también de las altas luces.
c) Sobreexposición
    Se llama así cuando llega demasiada luz a la película. Los detalles de las zonas...