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UNIVERSIDAD SAN FRANCISCO DE QUITO

LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA DE PLANTAS

Semestre 2do, año 2013-2014

Instructores:
Juan José Guadalupe E-mail: jguadalupe@usfq.edu.ec
Pablo Riera E-mail:priera@usfq.edu.ec
Horario: LMIJV 2:00-5:00 pm

TEMAS A DESARROLLAR
No.
TEMA

1

Influencia de la concentración en la actividad de la amilasa


2

Fotosíntesis

3Extracción de ADN

4

Selección Natural


El informe debe ser presentado en la siguiente práctica correspondiente a cada grupo



















UNIVERSIDAD SAN FRANCISCO DE QUITO
LABORATORIO DE BIOLOGÍA PARA INGENIERÍAS

PRÁCTICA No. 1
Influencia de la concentración en la actividad de la amilasa

Objetivo:

Observar la acción de la enzima amilasa sobrepolisacáridos (almidón) a distintas concentraciones
Comprobar la pre-digestión del almidón mediante el rompimiento de enlaces glucosídicos usando el colorante lugol.

Introducción:
La amilasa se encuentra en la saliva de muchos animales, incluyendo seres humanos, que utilizan el almidón como fuente de alimento. El almidón es la principal reserva de carbohidratos de las plantas; éste es unpolisacárido compuesto de un gran número de monómeros de glucosa unidos entre sí. Por otra parte, la amilasa es la responsable de la digestión preliminar del almidón. En adición, la amilasa rompe las cadenas de moléculas de almidón para transformarlas en azucares simples, rompiendo los enlaces glucosídicos (1,4) del almidón. Más aún, la digestión de este polisacárido requiere otras enzimas presentes en elpáncreas y en las secreciones intestinales.

Para que se facilite observar el proceso de transformación del almidón a maltosa se va a utilizar una solución I2, KI (lugol). Al momento de la implementación de esta solución, se observará cambios en el almidón no así en la maltosa, el cambio que se produce es el viraje de color a púrpura oscuro.

La tasa de desvanecimiento del almidón condistintas concentraciones de amilasa permitirá una medición cuantitativa de la tasa de reacción.

Materiales:
Tubos de ensayo de 15 ml
10 tubos de ensayo estándar
Lápiz de cera(o etiquetas)
Caja de muestra
Agua destilada
Vaso de precipitación con agua destilada 200ml
Cilindro graduado de 5ml
Pipeta calibrada de 1ml
2 Pipetas calibradas de 5ml
Pipetas Pasteur desechables
Pera de succiónSolución buffer pH= 6.8
Solución Lugol (I2, KI, H2O).
Solución de almidón 1%
Solución de amilasa 1%
Procedimiento
Preparar una disolución de amilasa (tubo de ensayo set 1)
a. Numerar 5 tubos de ensayo de 1 a 5
b. Usando los 5mL de la pipeta graduada, añada 5mL de agua destilada en cada tubo.
c. Hacer varias disoluciones de la siguiente manera (use una probeta)
Tubo1: añadir 5mL de amilasa ymezclar frotando el tubo entre sus manos (disolución 1:1; 0.5% de amilasa)
Tubo2: añadir 5mL de solución de amilasa del tubo 1 y mezclar (disolución 1:3; 0.25% de amilasa)
Tubo3: añadir 5mL de solución de amilasa del tubo 2 y mezclar (disolución 1:7; 0.125% de amilasa)
Tubo4: añadir 5mL de solución de amilasa del tubo 3 y mezclar (disolución 1:15; 0.063% de amilasa)
Tubo5: añadir 5mL desolución de amilasa del tubo 4 y mezclar (disolución 1:31; 0.031% de amilasa)

Lave correctamente la probeta

1. Preparar los tubos de ensayo (set 2)
a. Numere un segundo set de cinco tubos de ensayo de 1 al 5.
b. Comience con el tubo 5 del primer set, transfiera 2mL de la disolución en el tubo 5 del segundo set. Use una pipeta de 5mL para hacer la transferencia. Lave la pipeta en agua destiladay repita el procedimiento para los tubos 4, 3 y 2 transfiriendo 2mL al tubo 4 del primer set al tubo 4 del segundo set y sucesivamente. Al finalizar todas las transferencias, el tubo 1 del primer set no será utilizado.
c. Añadir 40 gotas de pH 6.8 de la solución buffer a cada tubo in el segundo set, Mezclar los tubos adecuadamente entre sus manos y colocar los tubos a un lado.
d. Añadir de...