Fraccionamiento Celular

El fraccionamiento celular o fraccionamiento es una técnica de laboratorio, tras la disgregación, en la que se intenta reagrupar las partículas, generalmente células u orgánulos celulares, en funciónde sus propiedades biofísicas.
Mediante el fraccionamiento celular se consigue separar conjuntos homogéneos, por lo general de orgánulos, a partir de una población heterogénea de células.Existen tres etapas principales en el fraccionamiento celular:
1. Disgregación o rotura (homogeneización) de las células y liberación de los orgánulos.
2. Macro filtración.
3. Purificación decomponentes celulares o fraccionamiento celular propiamente dicho: Se aplican técnicas de centrifugación diferencial y en gradiente.

Homogeneización
El tejido se homogeneíza, normalmente en una solucióntampón isotónica usando una variedad de mecanismos (moler, picar, triturar, cambios de presión, choque osmótico, congelación y descongelación, homogeneización con ultrasonidos).
La solución sehomogeneíza en una solución isotónica para detener el daño osmótico, con una solución tampón para regular el pH, y a una temperatura muy baja para evitar daños enzimáticos. Los orgánulos se mantienen enfrío, en un medio isotónico y tamponado.
El resultado ahora es una pasta fina de líquido, el homogenato de células, que consta de células intactas y componentes celulares. Con un cuidadoso trabajo semantienen intactos los orgánulos celulares, siendo funcionales en gran medida.

Filtración
Este paso puede no ser necesario dependiendo de la fuente de las células. Si se trabaja con tejidos animales,es probable que se liberen restos de tejido conectivo que debe ser eliminado. Habitualmente, la filtración se realiza ya sea mediante el vertido a través de un tejido poroso o con un filtrado porsucción empleando el correspondiente filtro de cerámica con un tamaño de poro adecuado.

Esquema del proceso de filtración.

Purificación
Se realiza por centrifugación en gradiente de densidad o...