Fraccionamiento de tejidos



FRACCIONAMIENTO DE TEJIDOS EN SUS PRINCIPALES CONSTITUYENTES


I. EL PROBLEMA.

Demostrar que en la composición de material biológico se encuentran carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos de acuerdo con su función biológica.

II. FUNDAMENTO TEÓRICO.

Los compuestos biológicos están hechos a partir de los mismos elementos que se encuentran en otras moléculas peropredominan algunos elementos; los más comunes son el carbono, hidrógeno, nitrógeno, oxígeno, fósforo y azufre. El agua es un componente importante de la célula y es la que eleva el porcentaje de composición del oxígeno.

Las reacciones químicas que se efectúan en la célula, forman y rompen enlaces de acuerdo con mecanismos comunes a toda la química, pero estas reacciones son catalizadas por enzimas,razón por la cual se llevan a cabo a velocidades muy rápidas. En estas transformaciones intervienen una serie de biomoléculas y biopolímeros que son indispensables para la célula; entre ellos tenemos las proteínas, que son biopolímeros grandes (formados por aminoácidos) que entre sus múltiples funciones están las de tipo estructural y la función catalítica (enzimas). Los carbohidratos son un grupode biomoléculas abundantes, en ellos tenemos los azúcares sencillos (glucosa), sus polímeros ( almidón) y algunos derivados (ácido galacturónico). En cuanto a los lípidos los más sencillos son los ácidos grasos, luego están algunas moléculas más grandes como los fosfolípidos, triglicéridos y otras más complejas como el HDL. Los ácidos nucleicos, ADN y ARN, son biopolímeros constituidos por losnucleótidos, los cuales a su vez están formados por un azúcar (ribosa), una base nitrogenada (como la citosina) y al menos un grupo fosfato.
Entre las principales pruebas de identificación de los compuestos biológicos se encuentran las siguientes:
Prueba de Molisch
Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de cualquier carbohidrato en el que los polisacáridos y oligosacáridos sehidrolizan con ácido sulfúrico concentrado hasta monosacáridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural, los cuales reaccionan con α-naftol formando un producto observable como un anillo de color rosado, violeta o morado.

Prueba de Benedict
La solución mantiene el mismo principio de la de Fehling y Barfoed en la que se oxida en medio alcalino y caliente a loscarbohidratos reductores, mientras se reduce el Cu2+ a Cu+ con la formación de un precipitado de Cu2O, observándose un color amarillo, naranja, rojo brillante o café.
Prueba de Lugol
El reactivo de Lugol consta de yodo diatómico (I2) y yoduro potásico (KI) y permite reconocer en el laboratorio polisacáridos ramificados o no, con diferentes colores dependiendo de su naturaleza química, por ejemplo, conel almidón (negro, azul oscuro, morado o violeta claro, dependiendo de la concentración del polisacárido), glucógeno y dextrinas (rojo-pardo).
Reacción de Millón
El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de mercurio a pH ácido, formando complejos color rojo ladrillo con el fenol de la tirosina, péptidos o proteínas que contienen este aminoácido.

Prueba deLieberman-Burchard
Se basa en la reacción coloreada (inicia rojo y progresa a verde) que dan aquellas sustancias que tienen como núcleo el ciclo pentanoperhidrofenantreno. El color se debe a que el grupo hidroxilo del colesterol reacciona aumentando la conjugación de la saturación en el anillo.
Prueba de saponificación
Es una prueba para identificar ácidos grasos, por lo tanto, general paralos lípidos que los contengan. Durante esta prueba estos compuestos reaccionan con una base y se obtienen las sales de los ácidos grasos, es decir jabones, detectables por agitación.

Prueba de difenilamina
Es una prueba para identificar ADN, durante este ensayo ocurre una hidrólisis ácida que remueve todas las bases púricas (hidrólisis de uniones N-glicosídicas entre pentosa y las bases)...