fraccionamiento Subcelular

INTRODUCCIÓN.
El fraccionamiento subcelular, es una de las técnicas más utilizadas para analizar los diferentes organelos y macromoléculas que componen y constituyen a la célula. Esta técnica,permite poder obtener los distintos componentes de una manera aislada, en cantidades grandes y en un alto estado de pureza, de acuerdo a los distintos métodos que se emplean en la realización de ella. Elfraccionamiento subcelular se basa de acuerdo a determinados fundamentos, como lo son la ruptura o homogenización, que consiste en el rompimiento del tejido o membrana, de tal modo que se liberen loscomponentes de la muestra.1
Existe distintos métodos de homogenización, como la sonicación (el grado de ruptura dependerá de la frecuencia, intensidad y energía del ultrasonido aplicado); shockosmótico (desprendimiento de mucosas); usos de detergentes que solubilizan las membranas celulares (como se hará en este caso con el Buffer de lisis), etc. Luego de la homogenización, el siguiente paso esel fraccionamiento subcelular propiamente tal, en el cual por medio de la centrifugación sucesiva de una muestra homogenizada, se obtiene el sedimento de los organelos en un campo gravitacional quedependerá de la masa y tamaño de esta. Cuando se centrifuga la muestra el resultado será el pellet (sedimento) y el sobrenadante (fracción liquida que está suspendida sobre el sedimento). El pelletobtenido de cada centrifugación se vuelve a suspender por separado del sobrenadante para ser analizado a la vista de un microscopio. 2
La centrifugación repetitiva del homogenizado nos dará comoresultado, la obtención de pequeñas partículas de los distintos organelos que se encuentren dentro de las células de nuestra muestra, como lo son: los núcleos, las mitocondrias, membrana plasmática,subunidades ribosómicas, etc.3
En el presente informe, se dará a conocer los resultados de este práctico. Se analizara los resultado de las centrifugaciones, de la muestra de un hígado de vaca, para así...