fraccionamiento

Desarrollo
Fraccionamiento celular:
Primero que nada se realizo con pequeños trozos de hígado y de acelga, solo cortando aquellas partes de la muestra enriquecida encloroplastos. Seguido de depositar cada fracción por separado en un mortero y adicionar suero fisiológico ( NaCl al 0,9%) y tritura. El primero paso en las fracciones a seguirfueron que con la ayuda de un pipeta pasteur se retiro el sobrenadante y se traslado a otro tubo de ensayo con tapa y luego se agitó.
Luego se filtro el homogeneizado con la ayudade un embudo y gasa hacia un tubo de centrifuga, ocupando respectivamente 2/3 de dicho tubo.
Seguido de que se centrifugo durante 10 minutos a 800 rpm para obtener lafracción 1 a (formándose el precipitado). Una vez al pasar los 10 minutos se retiro el sobrenadante y se coloco en otro tubo de centrifuga (limpio). Lo cual se repitió lo anterior a3000 rpm durante 30 minutos para obtener la fracción 2.
Por consiguiente a la fracción 1ª se le adiciono 2 ml (aprox) de una solución de sacarosa 1 M y se homogenizó.
Luego setomo otro tubo de centrifuga (limpio) y se adiciono en 1/3 del tubo una solución de sacarosa 2M y sobre esta 0,5/3 del homogeneizado de la fracción 1ª.
Después al finalizarlos 30 minutos para obtener la fracción 2 se retiro e introducción en la centrifuga el tubo para obtener la fracción 1b lo cual se centrifugo durante 10 minutos a 1000 rpm.
Dela fracción 2 se retiro el sobrenadante y se rotulo como sobrenadante A. Luego una ves transcurrido el tiempo de los 10 minutos a 1000 rpm de la fracción 1b con una pipetapasteur se retiro el sobrenadante y se rotulo como sobrenadante B.
En esta actividad al trabajar con una muestra de tipo vegetal no se le agrego azul de metileno.