Frotis De Sangre Periferica

FROTIS DE SANGRE PERIFERICA


¿Qué entendemos por frotis de sangre periférica?
Es el estudio microscópico que realiza el profesional de laboratorio o hematólogo, al realizar una lectura de las diferentes líneas celulares (LR, LB., LP)

¿COMO SE REALIZA SU PREPARACION Y TINCION?
1-Limpiar bien las láminas para su uso (sin grasa, Sin polvo ni detergente)
2-Identificar bien la lamina deestudio
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3- extendido realizarlo de la siguiente manera: colocar una gota de sangre fresca de aproximadamente 2mm sobre la lamina, tiene que existir una distancia de2 – 3 mm.. del esmeril de la lamina







Realizar el extendido rápidamente para evitar que se seque, para ello usar otra lamina con las esquinas cortadas,colocarla en un ángulo de 45° el extendido debe tener más o menos 30 mm de largo o sea 4 a 5 cm de longitud
Superficie lisa, uniforme, sin ondulaciones ni arrugas.
Tampoco deben haber espacios vacíos; la extensión no debe alcanzar los bordes ni los extremos del porta objeto.
-Los leucocitos no han de estar agrupados en los bordes ni en los extremos.
- Debe tener el espesor justo para que eleritrocito establezca contacto solo entre ellos, pero sin llegar a superponerse.





COLORACION


El colorante preferido es Wright, es una solución compuesta por Eosina – Azul de metileno en alcohol metílico (reacción acida –básica)
Los glóbulos blancos, tienen predilección por el azul de metileno, mientras que los glóbulos rojos se tiñen con Eosina.
Los GB, con gránulos toman amboscolorantes se denominan neutrófilos.
Los Basófilos, tienen predilección por el Azul de metileno (reacción básica).
Los eosinófilos, Se tiñen con eusina.
El buffer solución tampón sirve para forzar a los colorantes a penetrar el citoplasma.
OBSERVACION:
Cuando la soluc. Es muy acida, la eosina aparecerá con tonos demasiado intenso y el azul de metileno con tonos demasiado débiles.
Si por elcontrario es demasiado alcalina será lo contrario.
Tiempo de coloración sugerida por el lab. Central
-3 minutos con Wright
- 5 minutos con buffer
Mezclar hasta obtener un color verde metálico, nunca se sopla la lamina para mezclar ya que puede agregar saliva y el pH de la saliva es alcalino.
El tiempo de coloración dependerá del tiempo de maduración del colorante
RECOMENDACIONES

Usarextendidos de láminas que no tengan anticoagulantes y si es con anticoagulante realizarlo inmediatamente después de la extracción.
Explicación: Según los Hematólogos la mejor muestra es la sangre fresca sin anticoagulante ya que con el anticoagulante EDTA, puede sufrir cambios morfológicos las células a partir de 3 a 6 horas, ejemplo
-leucocitos presentan vacuolas y cambios nucleares degenerativos.-Los glóbulos blancos disminuyen
-ERS disminuyen.
-Plaquetas disminuyen.
-Reticulocitos disminuyen
Se observan plaquetas con un satelitismo en torno al leucocito, los eritroblastos en muestras de 1 a 2 días desaparecen.
- Los glóbulos rojos después de 6 horas se crenan, si la T° ambiente sube se acelera la cerenacion caso contrario si baja.
- Los recuentos de GB, Plaq, y la lámina sedebe realizar en las 2 horas siguientes a su extracción.
Cantidad de EDTA debe se de mas o menos de 1.5 mg/ ml de sangre.
EDTA: Sal sódica de acido etelindiamino tetracetico.
A mayor cantidad de EDTA afectará los GR. y los GB produciendo un encogimiento y cambios degenerativo, también disminuye el Hto.
COMO ANALIZAMOS EL FROTIS DE SANGRE PERIFERICA.
Buscar un área representativaque presenta una distribución homogénea de células.
Anotar y observar todas las diferentes anormalidades celulares que pueden observarse en los GB, GR, Plaq.
Valores normales en adulto:


Ns: 40 – 70 %
L: 20 – 45 %
E: 1 – 4 %
M: 2 – 8 %
B: 0 – 0.5 %








LÍNEA ROJA
-Proeritroblasto
-Eritroblastos basófilo
-Eritroblastos poli...