Frotis y Tincion de sangre
MATERIAL:
Portaobjetos
Pipetas graduadas de 5 – 10 ml
Pizetas
Cajas coplin
Microscopio
REACTIVOS:
Alcohol etílico al 70%
Alcohol metílico absoluto
Colorante deWright
Amortiguador
Aceite de inmersión
**FROTIS Y TINCION DE LA SANGRE **
Para efectuar el frotis o extensión de la sangre, se procede a tomar una gota con la superficie inferior de unportaobjetos limpio, recogiendo la gota junto a uno de los extremos, punto inicial del frotis. Se sujeta luego el portaobjetos entre el pulgar y el dedo medio de la mano izquierda o se coloca sobre una mesade modo que la gota de sangre quede en el extremo derecho; se toma otro portaobjetos entre el pulgar e índice de la mano derecha que servirá como extensor, debiendo tener los bordes (uno de losbordes) de los extremos perfectamente recto y cortando en ambos ángulos, el cual se apoya sobre la superficie libre de portaobjetos, inmediatamente delante de la gota de sangre.
Se aproxima luego a lamisma, la que se extiende por capilaridad a lo largo de dicho borde, procurando que ambos portaobjetos formen entre si un ángulo de aproximadamente 45°;
Se hace deslizar el portaobjetos extensor conuniformidad y seguridad hacia el otro extremo, con lo que deja tras si una fina película de sangre. Rápidamente se procede a secar el frotis por el portaobjetos al aire.
1- fijar el frotis con alcoholmetílico durante 1-2 minutos
2- el frotis se coloca entre 2 varillas en el vertedero y se cubre con el colorante de Wright durante 2 minutos.
3- Se añade una cantidad igual de soluciónamortiguadora o agua destilada para quitar el exceso de colorante con cuidado y se mezcla soplando suavemente
4- Se enjuaga nuevamente en agua destilada.
5- Se deja secar al aire en posición inclinada.
6- Seobserva al microscopio con objetivo de 100X
*COLORACION O TINCION DE SANGRE*
Muchas tinciones de Romanowsky se disuelven en alcohol metílico y combinan la fijación con la tinción. Entre los...
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