Frotis Y Tinciones
no importa –respondió Hu – SsongSi un necio lee muchos libros al final será solo un necio que ha leído muchos libros. Léelos tú, porque eso te dará conocimiento, pero acércate con amor a la gente, y escúchala, porque eso te dará sabiduría. Y la sabiduría es más importante que el conocimiento, pues la sabiduría es conocimiento con amor.
Eso
El
estudio microscópico de los microorganismos proporcionainformación fundamental para su identificación: Forma Tamaño Reacción a diferentes colorantes Estructura celular
Pureza Presencia
de contaminantes Variedad o edad de una población
Existen
dos técnicas generales empleadas para proporcionar material para la observación microscópica. Suspensión de los microorganismos en un liquido Películas o frotis secos, fijados yteñidos de la muestra
Suspensión de los microorganismos en un liquido
Gota pendiente (portaobjetos cóncavo) Preparación en fresco Permiten observar a los microorganismos vivos suspendidos en un fluido. Son útiles cuando la morfología del organismo que se observará puede distorsionarse por un tratamiento de calor o con productos químicos. Cuando son difíciles de teñir Cuandose desea observar procesos como la movilidad o la reproducción
Se
pueden observar por campo claro ajustando la fuente de luz o con filtros. La microscopia de campo oscuro y la de contraste de fases proporciona un mejor contraste entre el m.o. y el material de fondo. Se usa en laboratorio clínico de diagnostico, especialmente para protozoos.
Gota pendiente
Utilizar un palillopara colocar un poco de vaselina alrededor de la concavidad de un portaobjetos excavado. Si el cultivo que se va a observar se encuentra en medio sólido, preparar primero una suspensión en agua bajo condiciones asépticas. Tomar con un asa previamente flameada o una pipeta Pasteur una pequeña gota de la muestra y colocarla en el centro del cubreobjetos
Invertir y colocar el portaobjetos excavado yengrasado sobre el cubreobjetos que tiene la muestra procurando que ésta quede en el centro de la concavidad, oprimir suavemente la zona engrasada a fin de sellar y prevenir la evaporación Invertir rápidamente la preparación y verificar que los bordes del cubre estén sellados perfectamente por la vaselina. La gota de la muestra estará ahora colgado del cubre en el interior de la concavidad delportaobjetos Colocar el portaobjetos en la platina del microscopio, con el objetivo 10X y el diafragma cerrado 2/3 partes, localizar la gota pendiente.
Centrar la gota en el campo de observación y enfocar lentamente hasta observar los mos, su movilidad, la fisión binaria, la presencia de esporas o la forma de agrupación Se puede emplear pulque o agua de charco o infusión de paja. Variaragregando a la muestra una asada de rojo neutro o azul de metileno diluidos 1:10,000 o cristal violeta 1:2,000. La tinción a esta dilución tiñe pero no daña a los mos.
Preparación en fresco
Algas y protozoarios. Utilizando técnica aséptica, transferir una gota o asada del cultivo al centro de un porta. Las algas no requieren tinción; para observar protozoarios es recomendable trazarun círculo de metilcelulosa, colocar la muestra dentro del círculo y agregar rojo neutro o verde Janus 1:10,000 Cubrir la preparación con un cubre y examinar el centro de la preparación con los objetivos10x y 40X y baja intensidad de luz
Preparación en fresco
Hongos Colocar una gota de lactofenol azul de algodón sobre un porta objeto Utilizando técnica aséptica y con asa...
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