Fuentes De Radiaci N

Espectrofotómetro
UV/V

Elementos básicos
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Una fuente de radiación estable.
Selector de longitud de onda.
Portamuestras o celdas.
Detector o transductor de la radiación.
Procesamiento de señales y dispositivo de salida.

 Fuentes de radiación
• Salida estable de alta energía en un amplio intervalo de
longitudes de onda.
• Fuentes continuas para las mediciones de absorción
molecular.
•Lámparas de filamento de tungsteno: se utilizan
habitualmente como fuentes de radiación para
longitudes de onda del espectro visible y UV
próximo; son fuente de un espectro continuo de
energía radiante entre 360-950.

• Lámparas de filamentos de haluros de tungsteno: son
de mayor duración, producen más luz a longitudes de
onda cortas y emiten energía radiante de mayor
intensidad que las defilamento de tungsteno; para
mediciones en la región visible y UV próximo.
• Lámparas de hidrógeno y deuterio: producen un
espectro continuo en la región UV (220 a 360); la más
usada es la de deuterio, de mayor intensidad que la de
hidrógeno.
• Lámparas de arco de xenón: para λ entre 200 y 10.000
nm.

• Ejemplos de fuentes de radiación. (a) Lámpara de
deuterio para el rango UV. (b) Lámpara detungsteno para
el rango visible.

b) Fuentes discontinuas (de radiación discontinua):
• sólo emiten radiaciones de determinadas λ aisladas,
• por lo que se pueden considerar monocromáticas para
cada una de ellas;
• son útiles para la calibración de la λ pero resultan poco
prácticas para hacer medidas de absorbancia (a no ser
que se pretenda emplear una λ fija);
• no son utilizadas en muchosespectrofotómetros:
• Lámparas de vapores de mercurio: emiten un espectro
discontinuo o “espectro de líneas” (313, 365, 405, 436
y 546 nm); se emplean en espectrofotómetros para
cromatografía HPLC.

1.- FUENTES DE RADIACIÓN

Lámpara de Deuterio
Arco de Xenón

Lámpara de Wolframio

Arco de Xenón

Compartimientos de muestras
a) Muestras líquidas
• Celdas o cubetas fotométricas que se ubican en compartimientoso
contenedores especiales.
• Los contenedores pueden ser calentados o enfriados para controlar la
temperatura del líquido en la celda de muestra.
• Las características importantes de las celdas son:
 La forma de la celda puede ser rectangular o cilíndrica.
 El camino de la longitud de absorción, b, que se define como la
longitud de la trayectoria de radiación a través del medio
absorbente, esigual a la longitud del camino de la celda, l.
 Son también importantes el volumen y la sección transversal, el
material de la ventana (espesor de la ventana y el grado de
desviación del paralelismo de la ventanas).

• Celdas emparejadas. Una celda es la celda de la muestra,
mientras que la otra, es la de referencia (o blanco) En
espectrómetros de doble haz, la radiación atraviesa de
formasimultánea o alternativamente a través de las dos
celdas. En los instrumentos de un solo haz las celdas se
mueven secuencialmente en el haz de radiación.

Forma: pueden ser
• Cilíndricas
• Cuadradas
• Rectangulares: las más empleadas; las 2 caras que van a ser atravesadas
por la radiación, están pulidas y son perfectamente transparentes.
Tamaño: habitualmente tienen 1 cm de paso de luz
• Rectangulares:existen 3 versiones que tienen idénticas dimensiones
externas pero varían las internas:
• Normal
• Semimicro
• Micro

Material: puede ser
• Vidrio (borosilicato): la mayoría ; para λ  de 320-950 nm
• Plástico: para λ de 320-950 nm
• Cuarzo: para λ inferiores a 320 nm, porque el vidrio absorbe la luz UV;
también se podrían emplear para λ superiores pero su costo lo
desaconseja

• Dispositivostermostatizadores que mantienen las
cubetas a la temperatura adecuada para la medición
(generalmente con una corriente de agua a la temperatura
deseada, que fluye a través de una camisa que envuelve el
alojamiento de la muestra); importante cuando se
determinan actividades enzimáticas o se emplean
enzimas para realizar las mediciones.
• Hay cubetas de flujo continuo que poseen un orificio de...