Fundamentacion

del aceptor (“photobleaching”). Si se está teniendo lugar FRET la emisión del donador disminuye puesto que la energía es transferida al aceptor. Si se destruye la capacidad de excitación del aceptorla emisión del donador aumentará. Por tanto, estas técnicas nos permiten en su conjunto el estudio de la interacción entre proteínas que lleven acoplados fluoróforos ya que sólo si interaccionan entresí las proteínas los fluoróforos se encontrarán lo suficientemente próximos como para detectar FRET.
2. POSIBLES CAUSAS DE UNA MALA IMAGEN.
Podemos enumerar diferentes aspectos revisables para eldiagnóstico de una
mala imagen:
l. Verificar que la iluminación sea la correcta.
2. Verificar que las lentes del objetivo estén limpias.
3. Comprobar que entre el diafragma de campo y el deabertura, no haya ningún filtro difusor.
4. El centrado del revólver portaobjetivos debe ser el correcto.
5. El portaobjetos y el cubreobjetos deben estar limpios. Comprobar que el primero esté biencolocado, y que no haya dos cubreobjetos superpuestos.
6. Verificar la limpieza de todo el sistema óptico. Esto se puede efectuar haciendo girar por separado los oculares que el microscopio posea,comprobando si las pequeñas motas de suciedad se mueven Si es así, es que hay que limpiar el ocular.
Luego, habrá que hacer girar el tubo ocular en su conjunto; éste no debe ser
desmontado nunca, pero sí sepueden limpiar cuidadosamente los prismas soplando sobre las superficies accesibles. El objetivo puede limpiarse desenroscándolo ligeramente y ayudándose de un pincel seco.
7. Comprobar que elaceite de inmersión sea el suficiente, sin burbujas ni impurezas, y que no sea fluorescente.
8. Asegurarse de que el objetivo está bien enroscado.
9. Verificar el grosor del cubreobjetos, portaobjetos ymedio de montaje, que es decisivo, sobre todo en medianos y grandes aumentos. Es importante, igualmente, no colocar dos cubreobjetos superpuestos.
10. La montura del condensador debe estar bien...