Fundamentos De Quimica

o comparación de los datos de análisis de los patrones con los de la muestra problema, permite determinar composición, en algunos casos, y concentración de la sustancia desconocida. A continuación se va a tratar el uso de patrones en las técnicas instrumentales que son objeto de estudio en esta asignatura
▪ Métodos para calibrado en técnicas cromatográficas


•Calibrado con patrones del sistema de detección, los detectores proporcionan distintas respuestas para la misma concentración de dos solutos diferentes, lo que hace necesaria la calibración o cálculo del factor de respuesta del detector para cada analito. Para construir la recta de calibrado se preparan unos patrones de concentraciones conocidas y próximas a la del problema; se realiza la cromatografíapara los patrones y se calcula el área de los picos para cada patrón. A continuación se obtiene la gráfica correspondiente, representando en ordenadas la respuesta del detector (áreas) y en abscisas la concentración de los patrones. Esta debe ser una recta que pasa por el origen. Obteniendo, posteriormente, el cromatograma del problema, se interpola su área en la gráfica, para determinar laconcentración.


• Normalización interna, permite conocer la composición de la muestra en tanto porciento referida al total,[pic]La anterior ecuación no es totalmente correcta porque el detector tiene respuestas distintas, generalmente, para cada compuesto; por lo que es preciso calcular el factor de respuesta fi (en mg /cm2) para cada soluto, la
Ecuación anterior pasaa,[pic]El factor de respuesta fi es la pendiente de la recta de calibrado que representa áreas frente a concentraciones, para cada analito.


• Método de patrón interno, permite obtener mayor precisión en la obtención de la recta de calibrado y por tanto en el análisis cuantitativo, porque evita la incertidumbre causada por la inyección de la muestra, reduce errores causados porvariación de las condiciones experimentales y hace innecesario el cálculo de los factores de respuesta fi. La obtención de la recta de calibrado difiere de lo expuesto anteriormente en que tanto en la preparación de los patrones como en la del analito, se añade una cantidad idéntica de una sustancia que actúa de "patrón interno". La recta de calibrado se obtiene representando en ordenadas elcociente (Área patrón / Área patrón interno) frente a concentraciones de los patrones, en abscisas. Las características exigidas a la sustancia "patrón interno" son: No ser un componente original de la muestra. Naturaleza similar al resto de los solutos. Eludirse en el centro de los solutos a cuantificar. Separarse bien del resto de los solutos. Debe añadirse en concentraciones similares a la de losotros componentes de la muestra.


• Método de adición interna: en espectroscopia la ley que define la absorción de energía por parte de los sistemas atómicos y moleculares es la ley de Lambert-Beer que relaciona la absorción de energía, A, con la concentración, C, (A = abC).El método de adición interna consiste en tomar un volumen de muestra problema, cuya concentración se quiereconocer (Cx) y leer en el espectrofotómetro la absorbancia (Ax), la ecuación que relaciona concentración y absorbancia es: A = abC; donde:
Ax = a b Cx = Cte Cx A continuación, al volumen de muestra anterior se añade cantidad conocida del compuesto cuya concentración se quiere determinar, en una concentración Cs; en esta nueva circunstancia la ecuación que relacionaconcentración y la absorbancia es, Ax + s = a b (Cx + Cs) = Cte (Cx + Cs) De ambas ecuaciones se obtiene,[pic][pic][pic]La ecuación anterior representa una recta que no pasa por el origen, en la que las variables son Cs y Ax+s. En esta ecuación, si Ax+s = 0; Cx = - Cs Por tanto, si se representa en el eje de abscisa (Cs )i y en el eje de ordenadas (Ax+s)i, figura 2.4, se obtiene una recta que corta en el...