Genetica Molecular

Pontificia Universidad Católica Madre y Maestra
Facultad Ciencias de la Salud
Departamento de Estomatología


Lisbeth I. Hidalgo Brito
2013-0967

Genetica

Herramientas utilizadas por la genética molecular humana

Dra. Sámeli Fernández

Grupo 001

Viernes 20 de marzo del 2015
Santiago de los Caballeros, República Dominicana

Herramientas utilizadas por la genética molecular humana
La genéticamolecular es el campo de la biología que estudia la estructura y la función de los genes a nivel molecular. La genética molecular emplea los métodos de la genética y la biología molecular. Se denomina de esta forma para diferenciarla de otras ramas de la genética como la genética ecológica, la genética de poblaciones y la genética económica.
Existen tres técnicas de biología molecular utilizadaspor la genética molecular: amplificación; separación y detección de secuencias. La reacción en cadena de la polimerasa es específicamente utilizada para la amplificación, un "instrumento indispensable para una gran variedad de aplicaciones". En la técnica de separación y detección el ADN y elARNm son aislados a partir de sus células. La expresión del gen en células u organismos es hecha en un localo tiempo que no es normal para ese gen específico.
Clonación molecular:
El objetivo de la clonación molecular es aislar un gen o cualquier otra secuencia concreta de DNA y amplificarlo en cantidades suficientes que permitan su estudio. El proceso de la clonación molecular implica la transferencia de una secuencia de DNA de interés a una célula de un microorganismo.
Enzimas de restricción:
Unode los avances clave en el desarrollo de la clonación molecular fue el descubrimiento, al inicio de los años setenta, de las endonucleasas de restricción bacterianas, enzimas que reconocen secuencias de doble cadena específicas en el DNA y las escinden a nivel de los elementos fosfodiéster de la doble hélice del DNA en el lugar de reconocimiento o cerca de éste. Los sitios de corte pueden estarlocalizados de manera inmediatamente opuesta entre sí, en cuyo caso dan lugar a cadenas de DNA con extremos romos, o bien puede ocurrir que las zonas de fragmentación queden desfasadas por unas pocas bases en cualquier dirección, dando lugar a la aparición de resaltes laterales en los extremos 5’ o 3’ de la cadena de DNA denominados extremos cohesivos.
Vectores
Un vector es una molécula de DNA quepuede replicarse de manera autónoma en un huésped, como las células de levadura o bacterias, y que posteriormente puede ser aislado en forma pura para ser analizado. Tras la inserción de un fragmento de DNA humano en un vector por acción de la DNA ligasa, la nueva molécula que resulta puede ser introducida en un huésped bacteriano para la propagación del fragmento insertado junto con la moléculavector. Los vectores que se replican pueden formar un gran número de copias por célula y los huéspedes bacterianos pueden cultivarse de forma indefinida en el laboratorio, por lo que se pueden obtener grandes cantidades de las secuencias del DNA insertado.
Plásmidos
Los plásmidos son moléculas naturales de DNA circular de doble cadena presentes en bacterias y levaduras, y que se mantienen separadosy se replican de forma independiente de los cromosomas del propio microorganismo. Los plásmidos utilizados como vectores derivan de moléculas naturales que se descubrieron en bacterias debido a que contienen genes que confieren resistencia a los antibióticos y pueden transmitirse con facilidad de una bacteria a otra, por lo que extienden la resistencia rápidamente a toda la población microbiana.Genoteca
Una genoteca es una colección de clones cada uno de los cuales contiene un vector al que se ha insertado un fragmento diferente del DNA derivado del DNA o el RNA totales de una célula o tejido. Si la colección de clones tiene el tamaño suficiente, teóricamente debería contener todas las secuencias existentes en la fuente original de DNA. Es posible identificar en la genoteca un clon que...