Genetica
Páginas: 3 (519 palabras)
Publicado: 11 de diciembre de 2012
APLICACIONES DE LA HIBRIDIZACION
* La detección de secuencias de colonias bacterianas
Tras un clonaje típico, se requiere aislar aquella colonia bacteriana donde se encuentra la secuenciaobjeto del experimento. Una manera de conseguirlo consiste en sembrar el cultivo en medio solido y a una dilución adecuada; tras la incubación procedente, cada celula bacteriana habrá dado lugar a unacolonia (clon). Se toma filtros de esas placas y el DNA de cada colonia es desnaturalizado y fijado al soporte (colony blotting); la hibridación de estos filtros con una sonda adecuada, permitirádetectar la colonia buscada: se dispondrá de un clon en el que todas las células son portadoras de la secuencia; se habrá logrado el clonaje de la secuencia en cuestión.
* La detección de secuenciasgenómicas
La hibridación permite definir la presencia o ausencia de una secuencia en un DNA genómico siempre que se disponga de alguna otra secuencia mas o menos homologa que pueda funcionar comosonda. El procedimiento supone el aislamiento del DNA total de un cultivo, tejido y organismo completo, su rotura enzimática y separación de fragmentos mediante electroforesis, la transferencia de estosa un soporte solido, por ejemplo mediante Southern Blotting, y la hibridación del filtro con la sonda, previamente marcada; el revelado posterior permite detectar la existencia de la secuenciahomologa a la sonda y el tamaño del fragmento cromosómico donde se localiza. Este es el paso inicial para el posterior aislamiento de las secuencias genómicas. Ademas, la posibilidad de detectar secuenciasespecificas, incluso en un mezcla de gran complejidad, es la base de procedimientos analíticos de gran valor en medicina forense (huella genética) y preventiva (análisis génico prenatal).
* Ladetección y el análisis de mRNAs
La población de mensajeros en un cultivo bacteriano o en un tejido u órgano eucariota suele tener una notable complejidad. Su análisis electroforético produce...
* La detección de secuencias de colonias bacterianas
Tras un clonaje típico, se requiere aislar aquella colonia bacteriana donde se encuentra la secuenciaobjeto del experimento. Una manera de conseguirlo consiste en sembrar el cultivo en medio solido y a una dilución adecuada; tras la incubación procedente, cada celula bacteriana habrá dado lugar a unacolonia (clon). Se toma filtros de esas placas y el DNA de cada colonia es desnaturalizado y fijado al soporte (colony blotting); la hibridación de estos filtros con una sonda adecuada, permitirádetectar la colonia buscada: se dispondrá de un clon en el que todas las células son portadoras de la secuencia; se habrá logrado el clonaje de la secuencia en cuestión.
* La detección de secuenciasgenómicas
La hibridación permite definir la presencia o ausencia de una secuencia en un DNA genómico siempre que se disponga de alguna otra secuencia mas o menos homologa que pueda funcionar comosonda. El procedimiento supone el aislamiento del DNA total de un cultivo, tejido y organismo completo, su rotura enzimática y separación de fragmentos mediante electroforesis, la transferencia de estosa un soporte solido, por ejemplo mediante Southern Blotting, y la hibridación del filtro con la sonda, previamente marcada; el revelado posterior permite detectar la existencia de la secuenciahomologa a la sonda y el tamaño del fragmento cromosómico donde se localiza. Este es el paso inicial para el posterior aislamiento de las secuencias genómicas. Ademas, la posibilidad de detectar secuenciasespecificas, incluso en un mezcla de gran complejidad, es la base de procedimientos analíticos de gran valor en medicina forense (huella genética) y preventiva (análisis génico prenatal).
* Ladetección y el análisis de mRNAs
La población de mensajeros en un cultivo bacteriano o en un tejido u órgano eucariota suele tener una notable complejidad. Su análisis electroforético produce...
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