Genoteca como herramienta de la biotecnología
Páginas: 47 (11636 palabras)
Publicado: 19 de octubre de 2014
La genoteca como herramientade la biotecnología
Instituto Nacional de Investigaciones
Agrícolas
Centro Nacional de investigaciones
agropecuarias
La genoteca
como herramienta
de la ingeniería
genética
Ana Teresa Guillén
Investigador INIA-CENIAP
Unilab. Sanidad Animal
INIA. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias, Maracay. Venezuela
SERIE B - N° 19
Lagenoteca como herramienta de la biotecnología
© Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas - INIA, 2009
Edif. Gerencia General del INIA
Av. Universidad, vía El Limón, Maracay, Aragua. Venezuela.
Teléfonos: (58) 243 2833155 - 2833311 - 2834321 - 2833544
Apartado postal 2103
http://www.inia.gob.ve
Coordinación editorial: Alfredo Romero
Asistencia editorial: Jenny Gámez
Diagramación: SoniaPiña
Impresión y encuadernación: Taller de Artes Gráficas del INIA.
Hecho el Depósito de Ley
Depósito Legal: lf22320096004290
ISBN. 978-980-318-233-5
Prohibida la reproducción total o parcial de esta obra,
la recopilación en sistema informático, transmisión
en cualquier medio o forma, fotocopia u otros métodos
sin el permiso previo del INIA.
Impreso en Venezuela - Printed in Venezuela
La genoteca como herramientade la biotecnología
Contenido
I.
II.
III.
IV.
Introducción
Elaboración de genoteca
a. Obtención de ADNg y ARNm
b. Síntesis de ADNc
c. Vectores
d. Selección de bacterias que contienen el ADN
recombinante, cuando se usan plásmidos
como vector
e. Selección de fagos recombinantes
f. Métodos para evaluar las genotecas
g. Ejemplos degenotecas
h. Importancia de la elaboración de una genoteca
Bibliografía
Presentación
La genoteca como herramienta de la biotecnología
La genoteca como herramientade la biotecnología
I Introducción
Las técnicas de análisis del genoma desarrolladas a partir de
los años setenta han revolucionado los conocimientos a nivel
molecular de muchos procesos biológicos normales ypatológicos. Actualmente, es posible localizar, identificar, amplificar y secuenciar los genes que codifican las proteínas esenciales, y los
elementos reguladores de su expresión. También es factible expresar genes en sistemas apropiados, para analizar su función o
producir grandes cantidades de las proteínas que codifican.
Los avances de la genética molecular han revolucionado la vida
modernaporque han puesto a disposición de investigadores básicos y aplicados, cantidades ilimitadas de ácidos nucleicos con
información para la construcción de moléculas de importancia
clínica o industrial. Sea cual fuere la índole del ácido nucleico en
estudio, este debe ser aislado y caracterizado. Para esto, debe
ser generada una fuente permanente del material de manera
que se disponga decantidades suficientes para los estudios.
La caracterización molecular de un gen requiere tanto su identificación y aislamiento a partir del resto del genoma, como su
ampliación para poder obtener cantidades suficientes para su
análisis. Aunque es posible amplificar in vitro fragmentos de
ADN mediante PCR, la identificación y amplificación de genes
de interés se realiza muy a menudo recurriendo atécnicas que
permiten multiplicar in vivo un gen determinado, tras la introducción de una única copia del mismo en una célula hospedadora,
generalmente bacteriana. El número de copias del gen aumenta
a medida que se multiplica el organismo hospedador. El proce
La genoteca como herramienta de la biotecnología
so, en su conjunto, se denomina clonación molecular y se resume en los pasossiguientes:
comienza con el aislamiento del ADN genómico (ADNg)
Se
de varias células, que al ser digerido con enzimas de restricción, genera una enorme cantidad de segmentos cortos de ADN, llamados fragmentos de restricción. También
el ARN mensajero (ARNm) se puede usar como material
de partida. Como las moléculas de ARN son excepcionalmente lábiles, difíciles para amplificar en su forma...
Instituto Nacional de Investigaciones
Agrícolas
Centro Nacional de investigaciones
agropecuarias
La genoteca
como herramienta
de la ingeniería
genética
Ana Teresa Guillén
Investigador INIA-CENIAP
Unilab. Sanidad Animal
INIA. Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias, Maracay. Venezuela
SERIE B - N° 19
Lagenoteca como herramienta de la biotecnología
© Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas - INIA, 2009
Edif. Gerencia General del INIA
Av. Universidad, vía El Limón, Maracay, Aragua. Venezuela.
Teléfonos: (58) 243 2833155 - 2833311 - 2834321 - 2833544
Apartado postal 2103
http://www.inia.gob.ve
Coordinación editorial: Alfredo Romero
Asistencia editorial: Jenny Gámez
Diagramación: SoniaPiña
Impresión y encuadernación: Taller de Artes Gráficas del INIA.
Hecho el Depósito de Ley
Depósito Legal: lf22320096004290
ISBN. 978-980-318-233-5
Prohibida la reproducción total o parcial de esta obra,
la recopilación en sistema informático, transmisión
en cualquier medio o forma, fotocopia u otros métodos
sin el permiso previo del INIA.
Impreso en Venezuela - Printed in Venezuela
La genoteca como herramientade la biotecnología
Contenido
I.
II.
III.
IV.
Introducción
Elaboración de genoteca
a. Obtención de ADNg y ARNm
b. Síntesis de ADNc
c. Vectores
d. Selección de bacterias que contienen el ADN
recombinante, cuando se usan plásmidos
como vector
e. Selección de fagos recombinantes
f. Métodos para evaluar las genotecas
g. Ejemplos degenotecas
h. Importancia de la elaboración de una genoteca
Bibliografía
Presentación
La genoteca como herramienta de la biotecnología
La genoteca como herramientade la biotecnología
I Introducción
Las técnicas de análisis del genoma desarrolladas a partir de
los años setenta han revolucionado los conocimientos a nivel
molecular de muchos procesos biológicos normales ypatológicos. Actualmente, es posible localizar, identificar, amplificar y secuenciar los genes que codifican las proteínas esenciales, y los
elementos reguladores de su expresión. También es factible expresar genes en sistemas apropiados, para analizar su función o
producir grandes cantidades de las proteínas que codifican.
Los avances de la genética molecular han revolucionado la vida
modernaporque han puesto a disposición de investigadores básicos y aplicados, cantidades ilimitadas de ácidos nucleicos con
información para la construcción de moléculas de importancia
clínica o industrial. Sea cual fuere la índole del ácido nucleico en
estudio, este debe ser aislado y caracterizado. Para esto, debe
ser generada una fuente permanente del material de manera
que se disponga decantidades suficientes para los estudios.
La caracterización molecular de un gen requiere tanto su identificación y aislamiento a partir del resto del genoma, como su
ampliación para poder obtener cantidades suficientes para su
análisis. Aunque es posible amplificar in vitro fragmentos de
ADN mediante PCR, la identificación y amplificación de genes
de interés se realiza muy a menudo recurriendo atécnicas que
permiten multiplicar in vivo un gen determinado, tras la introducción de una única copia del mismo en una célula hospedadora,
generalmente bacteriana. El número de copias del gen aumenta
a medida que se multiplica el organismo hospedador. El proce
La genoteca como herramienta de la biotecnología
so, en su conjunto, se denomina clonación molecular y se resume en los pasossiguientes:
comienza con el aislamiento del ADN genómico (ADNg)
Se
de varias células, que al ser digerido con enzimas de restricción, genera una enorme cantidad de segmentos cortos de ADN, llamados fragmentos de restricción. También
el ARN mensajero (ARNm) se puede usar como material
de partida. Como las moléculas de ARN son excepcionalmente lábiles, difíciles para amplificar en su forma...
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