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DETERMINACIÓN DE HEMATOCRITOS


OBJETIVO
Aprender a realizar la prueba del hematocrito utilizando el macro y micrométodo, conocer su importancia en el diagnóstico de enfermedades y la forma adecuada de su procedimiento.

FUNDAMENTO
Este examen mide el volumen (cantidad) de glóbulos rojos en la sangre, comparado con otros componentes. Los resultados del examen se informan como unporcentaje o como un fragmento decimal de sangre entera. Este examen puede ser usado para evaluar o manejar enfermedades como enfermedad renal (riñón) en estado terminal, o insuficiencia cardíaca [1][2][3][4][5].
  El valor de hematocrito indica el porcentaje volumétrico de eritrocitos en sangre. El método de referencia para la determinación del hematocrito es la centrifugación. 

Mediante lacentrifugación se separan los componentes sólidos de la sangre de los líquidos y se envasan herméticamente. Este método está establecido en la norma DIN 58933-1. A continuación, los tubos capilares de vidrio “… se centrifugan hasta que el producto alcance una aceleración centrífuga relativa mínima que actúe sobre los eritrocitos (RCF ≥ 5.000) y un valor numérico de tiempo de centrifugado en minutos depor lo menos 100.000.”

MATERIAL
Tubo de Wintrobe graduado de 0-100 mm
Pipetas Pasteur
Equipo para venopuncion (Tubo lila)
Tubos capilares azules o rojos
Plastilina
Encendedor o cerillos
Centrifuga
Microcentrifuga 


SUSTANCIAS:
  Alcohol al 70%
  Sangre venosa









PROCEDIMIENTO:

Para macrohematocrito:
1.    Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcoholal 70%, y se practica punción venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA


2.    Llenar el tubo de Wintrobe con la sangre extraída con anticoagulante ayudándose de una pipeta Pasteur, comenzando desde el fondo hasta la marca superior de 100 mm, teniendo cuidado de no provocar espuma ni dejar burbujas en el tubo.


3.    Se recomienda como medida de precaución tapar el tubo conun tapón de goma para evitar la evaporación
4.    Centrifugar a 3000 rpm durante 30 minutos





5.    Leer directamente de la graduación la columna de glóbulos rojos y anotar resultados



Para Microhematocrito:
1.    Tomar la muestra en capilares rojos heparinizados directamente del dedo, o utilizar capilares azules sin heparina para sangre venosa con anticoagulante EDTA. Debellenarse aproximadamente 70-80% del capilar, sin dejar burbujas de aire.


2.    Ocluir (tapar) el extremo del capilar que no estuvo en contacto con la sangre, con plastilina o sellando con fuego
3.    Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de la microcentrifuga, con el extremo ocluido adherido al reborde externo de la plataforma


4.    Centrifugar por 5 minutos entre 10 000 y 12000 rpm
5.    Para leer el resultado, se lleva a cabo una regla de tres, midiendo el volumen total de plasma y eritrocitos o por medio de la regleta.
6.    Para la regleta, se sostiene el tubo frente a la escala de manera que el fondo de la columna de eritrocitos, quede exactamente al mismo nivel de la línea hroizontal correspondiente al cero
7.    Desplazar el tubo a través de la escalahasta que la línea marcada con el 1.0 quede al nivel del tope del plasma.  El tubo debe de encontrarse completamente en posición vertical


8.    La línea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicara la fracción del volumen de estos.


OBSERVACIONES:





Tras una centrifugación de la sangre total se pueden apreciar dos niveles, uno con el depósito de los glóbulosrojos, principalmente y en color rojo oscuro, otra capa blanca, de leucocitos y una delgada de color gris, que son plaquetas y finalmente otro nivel del plasma total, de un leve color amarillento. 

RESULTADOS:
En el tubo de Wintrobe se mide directamente el nivel de la columna de glóbulos rojos, comparando el número de la lectura con los siguientes porcentajes:

Hombres: 47.0 ±5.0%
Mujeres:...