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Páginas: 3 (549 palabras) Publicado: 24 de marzo de 2014

DESHIDROGENASA LACTICA (DHL o LDH)

Aspectos bioquímicos:
Esta enzima presente en el citoplasma de determinadas células corporales, es la responsable de oxidar el lactato en piruvato enpresencia de NAD (dinucleótido de nicotinamida y adenina) como cofactor para obtener piruvato más NAD reducido o hidrogenado (NADH); sin embargo, es importante señalar que esta enzima también tiene lacapacidad de producir el efecto inverso; es decir, convertir el piruvato en lactato por reducción del primero.
Existen 5 tipos de isoenzimas pertenecientes a esta clase de enzima que son:
LDH1, LDH2:Presente en el corazón, eritrocitos y los riñones.
LDH3: Presente en el cerebro y los riñones.
LDH4, LDH5: Presente en el hígado y músculo esquelético.


L-lactato + NAD+ L-piruvato + NADHCOO- COO-

CHOH + NAD+ CO + NADH

CH3 CH3

DETERMINACIÓN
Fundamento (Laboratorio Cromatest Linear Chemicals)

En esta prueba la LDH tiende a transferir únicamentehidrogeniones del NADH al piruvato para obtener lactato y NAD+ como productos finales, tal como lo indica la siguiente reacción:


L-Piruvato + NADH L-Lactato + NAD+




Reactivos:

Kit de reactivospara determinación de concentración de lactato deshidrogenasa de Linear Chemicals

Reactivo 1 L-Piruvato + Buffer TRIS + NaCl
Reactivo2 NADH

Técnica:

REACTIVOS y
MUESTRAReactivo RT
1 ml
Suero
20 ul
Mezclar e incubar a 37ºC por 30 segundos. Leer a 340 nm de longitud de onda encerando con agua destilada (método cinético), programando el equipo previamente a incubaciónpor 3 minutos más a la misma temperatura antes de obtener la lectura final.


El reactivo de trabajo se forma mezclando 4ml del R1 con 1ml del R2, el cual es estable por 2 meses a 4ºC.

Lamuestra idónea es suero libre de hemólisis más no plasma adquirido con utilización de ningún anticoagulante (Heparina, citrato, EDTA, oxalato), pues ocasionan turbidez a la muestra al momento que se...
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