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ddddddddddddddddddddFacultad de Medicina Humana y Ciencias de la Salud
Escuela Profesional de Estomatología
Cátedra de Microbiología y Parasitología General y Estomatológica
Msc. Blgos: Chávez Salas, Ivonne, Rondón Chambi, Romina y Vasquez Bezada, George
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II SIEMBRA EN TUBO: Lamayoría de medios usados en bacteriología pertenecen a uno de los siguientes tipos:
A. Siembra en medio liquido: Los caldos de cultivo en un tubo pueden ser inoculados por el método siguiente:
B. Siembra por picadura (tubo recto): Se utiliza para la siembra de cultivos semisólidos, como por ejemplo, el medio SIM, que es una prueba que permite la movilidad de las bacterias.
C. Siembra por estría(pico de flauta): Se realiza en medio sólido inclinado, es utilizado para conservar cepa durante largos periodos, así como para la realización de ciertas pruebas bioquímicas como la prueba de la ureasa.
D. Siembra por picadura y estría (pico de flauta): Consiste en unir las dos técnicas anteriores. Se realiza cuando el medio es sólido e inclinado. Se lleva a cabo en medios tales como el TSA, LIA,Citrato de Simmons.
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OBJETIVOS:
 Adquirir destreza en los diferentes tipos de siembra de microorganismos.
 Aprender una técnica para separar a lasbacterias de los demás microorganismos que se encuentran en una muestra.
 Mantener y aislar cepas microbianas de interés clínico.
MATERIALES:
 Placas Petri y tubos de ensayo con medios de cultivo: Agar nutritivo, Agar sangre, Agar MacConkey, Agar Chocolate.
 Probetas 100, 250ml.
 Muestras biológicas: secreción faríngea, mucosa oral, piel, orina y heces.
 Estufa.
 Mecheros.
 SoluciónSalina.
 Termómetro.
 Lápiz de cera.
 Asas microbiológicas (asas de Kohlle)
 Hisopos.
 Algodón.
 Alcohol 70.
 Guantes.
 10 tubos de ensayo con la solución salina previamente esterilizada.
 11 pipetas estériles de 1 ml.
 1 bagueta.
 6 placas Petri con Agar Cuenta Colonias.
PROCEDIMIENTO:
A. SIEMBRA EN PLACA:
 Puede utilizarse asas microbiológicas o un hisopo para la tomade muestra, si se realizan más de una estría, las siguientes se harán con el asa.
 Esterilizar previamente el asa a la llama del mechero cada vez que se tome la muestra y se incline una nueva estría
 Evitar romper el medio.
1. Estría simple:
 Con el asa de siembra estéril se distribuye el inóculo por estrías en zig-zag, con escasa separación de unas a otras (1 a 3mm).
2. Estría Múltiple:
Depositar el inoculo en el extremo superior de la placa extendiéndose de un lado a otro solo de la parte superior. Volver a flamear el asa, y sin coger muestras, girar la placa en ángulo de 90°, se repite lo anterior, lo que nos permite arrastrar la muestra desde uno de los bordes donde quedo la muestra hasta el otro extremo siguiendo la misma dirección, hasta que el último tramo se realizaráhacia el interior de la placa.
 Para el recuento semicuantitativo de colonias esparcir la muestra cubriendo toda la superficie del agar.
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