gluconogenesis





FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA DE MEDICINA HUMANA

DETERMINACION DE GLUCOSA SANGUINEA


OBJETIVOS

Determinar la concentración de glucosa sérica
Correlacionar los resultadosobtenidos en condiciones fisiológicas y patológicas

TEORIA

1. Realice una breve descripción de la glucosa (Fórmula, fuentes de obtención, transportadores en algunas células, importancia de laglucosa en el organismo)

2. Cuales son las vías metabólicas para la glucosa? Explique cada una.

3. Donde se realizan a nivel intracelular cada una de estas vías metabólicas

4. Cuales son lashormonas implicas en los mecanismos de regulación de la glucosa sanguínea. Describa brevemente cada una.

METODO: GOD –PAP
FUNDAMENTO

La glucosa presente en la muestra es oxidadaenzimaticamente por catálisis de la glucosa oxidasa (GOD) a ácido glucónico (gluconato) y peróxido de hidrógeno (H2O2), este último reacciona con el cromóforo 4-aminofenazona y fenol en presencia de la enzimaperóxidasa (POD) formando un complejo rojo-violeta que es directamente proporcional a la concentración de glucosa sanguínea. La secuencia de reacciones que ocurren en los tubos que contienen el estandar(patrón) o la muestra son:

GLUCOSA + O2 + H2O GOD ACIDO GLUCÓNICO + H2O2

2H2O2 + 4-AMINOFENAZONA + FENOL POD QUINONEIMINA + 4H2O

REACTIVOS Y ESTANDAR

Agua destiladaSolucion estandar ó patrón de glucosa = 100 mg/dL ó 5.55 mM
Solución reactiva que contiene: * Buffer de fosfato (pH 7.5)
* 4- aminofenazona
* Fenol
* Glucosa oxidasa (GOD)
*Peroxidasa (POD)
* Mutarrotasa


PROCEDIMIENTO

Muestras: Suero, plasma heparinizado, líquido cefalorraquideo y orina
Longitud de onda: 500 nm, Hg 546 nm

Marcar 3 tubos como blanco (B),patrón o estandar (E), muestra (M) y medir en cada uno un volumen como se indica a continuación













Mezclar, deje reposar 10 minutos a temperatura ambiente (20 – 25 ºC)....