GLUCOSA
Páginas: 7 (1713 palabras)
Publicado: 28 de octubre de 2013
UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ G ALLO
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
PRÁCTICA N° 10: ESPECTROFOTOMETRÍA
I. OBJETIVOS:
La presente práctica de laboratorio persigue como objetivos:
-Conocer el manejo del espectrofotómetro.
-Determinar y graficar curvas de calibración (Concentración vs. Absorbancia) para soluciones de glucosa.
-Determinar concentraciones demuestras problemas, a partir de su absorbancia leída en el espectrofotómetro.
II. FUNDAMENTO:
El método espectrofotométrico está basado en la cuantificación de la cantidad de luz que absorbe o transmite una solución coloreada en función de la longitud de onda. Esta determinación de mucha aplicación en los laboratorios de bioquímica, no sólo se realiza en la región del espectrovisible, sino quees posible hacer determinaciones en las regiones del ultravioleta e infrarroja del espectro.
Las medidas de absorción de luz encuentran su aplicación más importante en el análisis cuantitativo (determinación de componentes o aditivos alimentarios). Para ello primeramente se hace uso de métodos químicos con sustancias coloreadas, luego mediante la densidad óptica, es posible determinar laconcentración de los componentes en la muestra mediante la curva de calibración stándar.
Portocarrero (1981), cuantificó espectrofotométricamente el aceite de pescado en aceites compuestos, observándose que la Ley de Lambert y Beer se cumple satisfactoriamente en una mezcla ternaria (soya-pescado-algodón) hasta con un 50% de aceite de pescado y en una mezcla binaria (soya-pescado) hasta un 60% deaceite de pescado. Las condiciones durante la prueba fueron: tiempo de reacción de 2 horas, en completa oscuridad, temperatura de 26C, volumen de muestra 0,5 ml; 5 ml de solución cloroformo/ácido acético, 0,25 ml. de solución bromo/cloroformo y una longitud de onda de 595 nm.
Pizarro (1984), determinó espectrofotométricamente los fenoles totales en caballa ahumada en caliente, encontrando quela Ley de Lambert y Beer se cumple en un rango de concentraciones muy variable para cada estándar usado, observando que los reactivos F-D y F-C, reaccionan con todos los estándares a bajas concentraciones, siendo el último más sensitivo.
Elías (1990), desarrolló un método espectrofotométrico para la determinación de ácido oleanólico y saponinas en quinua, logrando obtener un 10,7% de error deexactitud por defecto, frente a la evaluación gas cromatográfica.
Como se puede apreciar, las técnicas espectrofotométricas son de gran utilidad en la industria de alimentos.
Todos los espectrofotómetros son de construcción muy parecida, tienen como componentes principales: Fuente Luminosa, ajuste de intensidad, selector de longitud de onda, portamuestra y un detector, un registrador oinstrumento indicador. En aparatos sencillos se prescinde de algunas partes aisladas.
En los espectrofotómetros se coloca un tubo de líquido en una ranura y luego se dirige a través de un tubo la luz de una longitud de onda seleccionada. El grado de absorción dependerá del color del líquido y su intensidad. Dos líquidos del mismo color e intensidad exactos, transmitirán fracciones iguales de la luzdirigidas a través de ellos. Si uno de los líquidos es jugo y el otro el mismo jugo diluído, la última muestra transmitirá una mayor fracción de la luz entrante y esto causará una desviación proporcionalmente mayor de la aguja sensoria en el instrumento, también puede medir la claridad o turbidez de un líquido mediante la cantidad de luz que deja pasar (Maier, 1981).
Ley de Lambert y Beer
Laespectrofotometría relaciona la intensidad de una luz que incide y pasa a través de una sustancia con la intensidad de la luz que sale de esa muestra. Está regida por algunas leyes como la de Lambert, la cual afirma que la intensidad de la luz transmitida a través de un medio homogéneo disminuye geométricamente a medida que el espesor de la muestra aumenta aritméticamente. La Ley de Beer por...
ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
PRÁCTICA N° 10: ESPECTROFOTOMETRÍA
I. OBJETIVOS:
La presente práctica de laboratorio persigue como objetivos:
-Conocer el manejo del espectrofotómetro.
-Determinar y graficar curvas de calibración (Concentración vs. Absorbancia) para soluciones de glucosa.
-Determinar concentraciones demuestras problemas, a partir de su absorbancia leída en el espectrofotómetro.
II. FUNDAMENTO:
El método espectrofotométrico está basado en la cuantificación de la cantidad de luz que absorbe o transmite una solución coloreada en función de la longitud de onda. Esta determinación de mucha aplicación en los laboratorios de bioquímica, no sólo se realiza en la región del espectrovisible, sino quees posible hacer determinaciones en las regiones del ultravioleta e infrarroja del espectro.
Las medidas de absorción de luz encuentran su aplicación más importante en el análisis cuantitativo (determinación de componentes o aditivos alimentarios). Para ello primeramente se hace uso de métodos químicos con sustancias coloreadas, luego mediante la densidad óptica, es posible determinar laconcentración de los componentes en la muestra mediante la curva de calibración stándar.
Portocarrero (1981), cuantificó espectrofotométricamente el aceite de pescado en aceites compuestos, observándose que la Ley de Lambert y Beer se cumple satisfactoriamente en una mezcla ternaria (soya-pescado-algodón) hasta con un 50% de aceite de pescado y en una mezcla binaria (soya-pescado) hasta un 60% deaceite de pescado. Las condiciones durante la prueba fueron: tiempo de reacción de 2 horas, en completa oscuridad, temperatura de 26C, volumen de muestra 0,5 ml; 5 ml de solución cloroformo/ácido acético, 0,25 ml. de solución bromo/cloroformo y una longitud de onda de 595 nm.
Pizarro (1984), determinó espectrofotométricamente los fenoles totales en caballa ahumada en caliente, encontrando quela Ley de Lambert y Beer se cumple en un rango de concentraciones muy variable para cada estándar usado, observando que los reactivos F-D y F-C, reaccionan con todos los estándares a bajas concentraciones, siendo el último más sensitivo.
Elías (1990), desarrolló un método espectrofotométrico para la determinación de ácido oleanólico y saponinas en quinua, logrando obtener un 10,7% de error deexactitud por defecto, frente a la evaluación gas cromatográfica.
Como se puede apreciar, las técnicas espectrofotométricas son de gran utilidad en la industria de alimentos.
Todos los espectrofotómetros son de construcción muy parecida, tienen como componentes principales: Fuente Luminosa, ajuste de intensidad, selector de longitud de onda, portamuestra y un detector, un registrador oinstrumento indicador. En aparatos sencillos se prescinde de algunas partes aisladas.
En los espectrofotómetros se coloca un tubo de líquido en una ranura y luego se dirige a través de un tubo la luz de una longitud de onda seleccionada. El grado de absorción dependerá del color del líquido y su intensidad. Dos líquidos del mismo color e intensidad exactos, transmitirán fracciones iguales de la luzdirigidas a través de ellos. Si uno de los líquidos es jugo y el otro el mismo jugo diluído, la última muestra transmitirá una mayor fracción de la luz entrante y esto causará una desviación proporcionalmente mayor de la aguja sensoria en el instrumento, también puede medir la claridad o turbidez de un líquido mediante la cantidad de luz que deja pasar (Maier, 1981).
Ley de Lambert y Beer
Laespectrofotometría relaciona la intensidad de una luz que incide y pasa a través de una sustancia con la intensidad de la luz que sale de esa muestra. Está regida por algunas leyes como la de Lambert, la cual afirma que la intensidad de la luz transmitida a través de un medio homogéneo disminuye geométricamente a medida que el espesor de la muestra aumenta aritméticamente. La Ley de Beer por...
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