GLUTATION S-TRANSFERASA P1-1 HUMANA Y GLUTATION REDUCIDO; ESTUDIO TERMODINAMICO DE SU INTERACCION

Las glutation S-transferasas (EC 2.5.1.18) pertenecen a una familia de enzimas de gran
importancia en mecanismos de desintoxicación celular, eliminando xenobióticos o substancias
nocivas para lascélulas. Estas enzimas catalizan el ataque nucleofílico del sustrato fisiológico,
glutation reducido ó GSH (g-Glu-Cys-Gly) sobre el centro electrófilo de un gran número de
estructuras tóxicas. Enmamíferos estas isoenzimas (GSTs) existen como homdímeros o como
heterodímeros, tienen una masa molecular de aproximadamente 25 kDa por subunidad y un
sitio activo por monómero. Se clasifican ensiete familias (alpha, kappa, mu, pi, sigma, theta y
zeta) que se diferencian tanto en su secuencia, propiedades inmunológicas y papel fisológico
(1).
La GST humana de la clase pi (hGST P1-1)está implicada en el desarrollo de
resistencia de tumores frente diversos fármacos anticancerígenos (2). Se ha observado que la
expresión de hGST P1-1 es elevada en algunos tumores humanos comocánceres de pulmón,
colon, ovario, testículos, vejiga, bucal y riñón. Por tanto el uso de inhibidores específicos de la
enzima podrían potenciar la eficacia de la quimioterapia sobre tumores resistentesa drogas
anticancerígenas (3).
En el presente trabajo se estudia la interacción de GSH con hGST P1-1, mediante
calorimetría isotérmica de valoración. La calorimetría nos va proporcionar losvalores del
cambio de entalpía y constante de equilibrio, a partir de los cuales vamos a poder determinar
los cambios de entropía y energía de Gibbs. Las medidas calorimétricas en diferentes
tamponescon distintos calores de ionización revelan una cesión de protones por parte del
complejo GSH-hGSTP1-1 hacia el medio de la reacción. Similares resultados obtuvieron
Caccuri et al (4) mediante elanálisis cinético de GSH con hGST P1-1 en el que se demostraba
que el protón del grupo tiol del GSH era liberado al medio durante el proceso de unión.
Experimentos a diferentes temperaturas en...