GOT

GOT (AST)

GOT (AST)
NADH. Cinético UV. IFCC rec.
Determinación cuantitativa de aspartato aminotransferasa
GOT (AST)
IVD
Conservar a 2-8ºC
PRINCIPIO DEL METODO
La aspartato aminotransferasa (AST) inicialmente llamada
transaminasa glutamato oxaloacética (GOT) cataliza la transferencia
reversible de un grupo amino del aspartato al α-cetoglutarato con
formación de glutamato y oxalacetato. Eloxalacetato producido es
reducido a malato en presencia de malato deshidrogenasa (MDH) y
NADH:
AST

Aspartato + α-Cetoglutarato ⎯⎯⎯→ Glutamato + Oxalacetato
MDH

4. Mezclar, incubar 1 minuto.
5. Leer la absorbancia (A) inicial de la muestra, poner en marcha el
cronometro y leer la absorbancia cada minuto durante 3 minutos.
6. Calcular el promedio del incremento de absorbancia por minuto
(∆A/min).CALCULOS
∆A/min x 1750 = U/L de AST
Unidades: La unidad internacional (UI) es la cantidad de enzima que convierte 1 µmol
de substrato por minuto, en condiciones estándar. La concentración se expresa en
unidades por litro (U/L).

Factores de conversión de temperaturas
Los resultados pueden transformarse a otras temperaturas multiplicando por:
Temperatura
de medición
25ºC
30ºC
37ºC

Oxalacetato + NADH + H⎯⎯ ⎯
⎯→ Malato + NAD
La velocidad de disminución de la concentración de NADH en el
medio, determinada fotometricamente, es proporcional a la
1
concentración catalítica de AST en la muestra ensayada .
+

+

SIGNIFICADO CLINICO
La AST es una enzima intracelular, se encuentra en niveles altos en
el músculo del corazón, las células del hígado, las células del
músculo esquelético y en menor cantidad enotros tejidos.
Aunque un nivel elevado de AST en suero no es específico de
enfermedad hepática se emplea principalmente para su diagnóstico y
seguimiento, junto con otras enzimas como la ALT y ALP. También
se utiliza en el control post-infarto, en pacientes con desordenes del
1,4,5
músculo esquelético, y en otras afecciones .
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los
datosclínicos y de laboratorio.
REACTIVOS
TRIS pH 7,8
R1
L-Aspartato
Tampón
NADH
Lactato deshidrogenasa (LDH)
R2
Malato deshidrogenasa (MDH)
Substrato
α-Cetoglutarato

80 mmol/L
200 mmol/L
0,18 mmol/L
800 U/L
600 U/L
12 mmol/L

CONSERVACION Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a2-8ºC, protegidos de la luz y se evita su contaminación.
No usar las tabletas si aparecen fragmentadas.
No usar reactivos fuera de la fecha indicada.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
- Presencia de partículas y turbidez.
- Absorbancias del Blanco a 340 < 1,00.
MATERIAL ADICIONAL
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm.
- Baño termostatable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC (± 0,1ºC)
-Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Equipamiento habitual de laboratorio.

MUESTRAS
1
Suero o plasma . Estabilidad de la muestra: 7 días a 2-8ºC.
PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .340 nm
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . 1 cm paso de luz
Temperatura constante . . . . . . . . . . .. . . .25ºC / 30ºC /37ºC
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada o aire.
3. Pipetear en una cubeta:
RT (mL)
Muestra (µL)

37ºC
2,08
1,54
1,00

1

VALORES DE REFERENCIA
25ºC
30ºC
37ºC
Hombres
Hasta 19 U/L
26 U/L
38 U/L
Mujeres
Hasta 16 U/L
22 U/L
31 U/L
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
establezca sus propios valores de referencia.
CARACTERISTICAS DEL METODORango de medida: Desde el limite de detección 5,44 U/L hasta el limite de
linealidad 260 U/L.
Si la concentración de la muestra es superior al limite de linealidad, diluir 1/10
con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 10.
Precisión:
Media (U/L)
SD
CV (%)

Reactivo de trabajo (RT):

Tapar y mezclar suavemente hasta disolver su contenido.
Estabilidad: 21 días a 2-8ºC o 72 horas a...