Grado En Biologia


Cuaderno de Resultados
Determinación del Metabolismo Fotosintético utilizado por Plantas Vasculares.

Ayxa Pineda Ríos




En esta práctica hemos estudiado y realizado distintas pruebas para la valoración y determinación del tipo de metabolismo usado por diversas plantas vasculares: C3, C4, o CAM. Las plantas usadas han sido 4 no suculentas (plantas 1, 2, 3 y 4), y una especiesuculenta, en condiciones de ventana (KHEV) y en condiciones de laboratorio (KHEL)
Además también hemos preparado un medio de cultivo nutritivo.
En este cuaderno se muestran todos los cálculos realizados, los datos obtenidos y además se valoraran estos últimos.
1) Actividad PEPC de las especies no suculentas
Para el cálculo de la actividad PEPC utilizamos una técnica de ensayo acoplada mediante lacual seguimos especfotométricamente la oxidación del NADH. La reacción es la siguiente:
PEPC MDH
+ PEP Oxalacetato +NADH

A partir de los datos obtenidos podremos hallar la variación de concentración en cada planta utilizando para ello la ecuación de Lambert-Beer, para ello debemos conocer el coeficiente de extinción del NADH, E = .
∆DO = ∆C x E x 1cm (paso de luz de la cubeta)

A partir de esta ecuación podremos hallar el decremento de NADH, el cual está directamente relacionado con laactividad PEPC. Para ello debemos hallar el decremento de DO en cada caso. A continuación se han representado los valores obtenidos en los gráficos adjuntos y hemos hallado la pendiente en las zonas donde esta es máxima, de este modo la pendiente será el decremento de densidad óptica (∆DO), que como sabemos en la ecuación de la recta es el numero que multiplica a X.
 
 
∆ Densidad
Óptica
 Tiempo (min)
PLANTA 1
PLANTA 2
PLANTA 3
PLANTA 4
0,5
2,051
--
1,207
1,513
1
1,863
2,299
0,914
1,466
1,5
1,492
2,058
0,701
1,438
2
1,488
1,973
0,676
1,415
2,5
1,485
1,991
0,677
1,405
3
1,479
1,964
0,679
1,367
3,5
1,476
1,906
0,688
1,332
4
1,478
1,934
0,691
1,324
4,5
1,482
1,916
0,689
1,274
5
1,481
1,913
0,693
1,218









Acontinuación vamos a calcular el decremento de NADH, o actividad PEPC expresada en diferentes unidades.
PLANTA 1
C = = =
X =
3,01 X = 15,05
15,05 / 7,65 mg clorofila = 1,977 µmol
PLANTA 2
C= = = 0,053
0,053 X =
X = 8,76
8,76 / 3,06 mg clorofila 2,86 µmol
PLANTA 3
C= = = 0,08
0, 08 X =
X = 13, 41
13,41 / 6,3 mg clorofila 2,128 µmol
PLANTA 4
C= = = 0,0095
0, 0095 X =
X = 1,584
1,584 / 5, 7 mg clorofila 0,2478 µmol
El dato de la cantidad de clorofila (mg clorofila x ) usado en el último paso en cada caso anterior también lo hemos hallado durante el desarrollo de esta y esta detalladamente explicado en el siguiente punto (2).
2) Cantidad de clorofila de todas las especies
Para la determinación de la cantidad de clorofila hemosutilizado el método de Arnon explicado en el protocolo de la práctica. Los resultados obtenidos se presentan a continuación en dos unidades distintas.
En esta ocasión hemos vuelto a utilizar la ecuación de Lambert- Beer. El coeficiente de extinción de la clorofila (E) es: .


DENSIDAD ÓPTICA
PLANTA 1
0,018
PLANTA 2
0,049
PLANTA 3
1,79
PLANTA 4
0,704
KHEV
1,479
KHEL
1,323

KHELC= = = 2,318 x
2,318 x = 0, 1738
KHEV
C= = = 1, 42 x
1, 42 x = 0, 1065
PLANTA 1
C= = = 0,051
0,051 = 7,65



PLANTA 2
C= = = 0,0204
0,0204 = 3,06
PLANTA 3
C= = = 0,042
0,042 = 6,3
PLANTA 4
C= = = 0,038
0,038 = 5,7

3) Cálculos para la preparación del medio nutritivo
El medio nutritivo que hemos preparado se compone de macronutrientes y...