Gram + y Gram -

1-Objeto y campo de aplicación
• El objetivo principal de esta práctica es la clasificación de microorganismos (M.O.) según su captación y retención o no del colorante de Gram. Determinaremos sin son Gram + o Gram -.
• Uno de los objetivos secundarios sería afianzar el uso del microscopio con diferentes objetivos y mejorar la preparación de muestras.
• El campo de aplicación es lamicrobiología.
2-Referencia a la norma
Apuntes e instrucciones facilitados por el profesor del módulo.
3- Definiciones
• Tinción: o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio.
Tinción de Gram: es un tipo de tinción diferencial empleado en Bacteriología para la visualización de bacterias, sobre todo en muestras clínicas. Seutiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color morado, y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa o rojo o grosella
• Gram +: bacterias que se tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción deGram, de aquí el nombre de "Gram-positivas" o también "grampositivas". Esta característica química está íntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular por lo que refleja un tipo natural de organización bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias, y cuando se tratan como taxón se utiliza también el nombre de Posibacteria. La envoltura celular de las bacterias Gram-positivascomprende la membrana citoplasmática y una pared celular compuesta por una gruesa capa de peptidoglucano, que rodea a la anterior.
Gram - : no se tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción de Gram, de aquí el nombre de “Gram-negativas” o también “gramnegativas”. Esta característica está íntimamente ligada a la estructura de la envoltura celular, por lo que refleja un tipo natural deorganización bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias y cuando se tratan como taxón se utiliza también el nombre de Negibacteria.2 Las restantes son las bacterias Gram positivas. Las bacterias Gram-negativas presentan dos membranas lipídicas entre las que se localiza una fina pared celular de peptidoglicano, mientras que las bacterias Gram-positivas presentan sólo una membrana lipídica yla pared de peptidoglicano es mucho más gruesa. Al ser la pared fina, no retiene el colorante durante la tinción de Gram.
• Bacteria: Microorganismo unicelular procarionte, cuyas diversas especies causan las fermentaciones, enfermedades o putrefacción en los seres vivos o en las materias orgánicas.
• Colorante: son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltarestructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios.
4-Fundamento teórico
Teñir los microorganismos proporciona suficiente contraste para poder visualizarlos con un microscopio de campo claro. Hace que las células aparezcan mayores que lo que son realmente.
La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidadespecífica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculascargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas proteínas. Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo.
Algunos colorantes teñirán mejor sólo después de que la célula haya sido tratada con otra sustancia química, que no es un colorante por sí mismo. Esta sustancia se denomina mordiente; un...