Gram

Los fundamentos de la técnica se basan en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram negativas. La pared celular de las bacterias Gram positivas posee unagruesa capa de peptidoglucano, además de dos clases de ácidos teicoicos: Anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la membrana plasmática, se encuentra el ácido lipoteicoico, y más en lasuperficie, el ácido teicoico que está anclado solamente en el peptidoglucano (también conocido como mureína)
Por el contrario, la capa de peptidoglucano de las Gram negativas es delgada, y seencuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior (de composición distinta a la interna) por medio de lipoproteínas. Tiene una capa delgada de peptidoglicano unida a una membrana exterior porlipoproteínas. La membrana exterior está hecha de proteína, fosfolípido y lipopolisacárido.

La utilidad
La tinción de Gram ayuda a determinar rápidamente las características morfológicas, por lo quees útil en la indicación de los antibióticos.
Esta tinción también permite establecer si el material enviado al laboratorio para su cultivo posee la calidad adecuada.
Identificación preliminar dela bacteria causal de la infección.
Utilidad como control calidad del aislamiento bacteriano.


Describe brevemente los pasos para realizar la técnica de Gram.

Recoger muestras.
Hacerel extendido en espiral.
Dejar secar a temperatura ambiente.
Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado 3 veces aprox.)
Agregar cristal violeta o violeta degenciana y esperar 1 min.
Enjuagar con agua.
Agregar lugol y esperar entre 1 minuto.
Enjuagar con agua.
Agregar acetona y/o alcohol y esperar 4 segundos (parte critica de la coloración)Enjuagar con agua.
Tinción de contraste agregando safranina o fucsina básica y esperar 1min
Enjuagar con agua.

Para observar al microscopio óptico es conveniente hacerlo a 100x con...