GUÍA COLIFORMES1
Páginas: 5 (1201 palabras)
Publicado: 2 de octubre de 2015
GUÍA PARA COLIFORMES TOTALES Y FECALES POR EL MÉTODO DE MEMBRANA
Información tomada y adaptada de: http://fundacion.usal.es/microaguas
Los coliformes totales son las Enterobacteriaceae lactosa-positivas y constituyen un grupo de bacterias que se definen más por las pruebas usadas para su aislamiento que por criterios taxonómicos. Pertenecen a la familiaEnterobacteriaceae y se caracterizan porsu capacidad para fermentar la lactosa con producción de ácido y gas, más o menos rápidamente, en un periodo de 48 horas y con una temperatura de incubación comprendida entre 30-37ºC.
Son bacilos gramnegativos, aerobios y anaerobios facultativos, no esporulados. Del grupo <> forman parte varios géneros: Escherichia, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter, etc. Se encuentran en elintestino del hombre y de los animales, pero también en otros ambientes: agua, suelo, plantas, cáscara de huevo, etc.
Una elevada proporción de los coliformes que existen en los sistemas de distribución no se debe a un fallo en el tratamiento en la planta, sino a un recrecimiento de las bacterias en las conducciones. Dado que es dificil distinguir entre recrecimiento de coliformes y nuevascontaminaciones, se admite que todas las apariciones de coliformes son nuevas contaminaciones, mientras no se demuestre lo contrario.
Dentro del grupo de los coliformes totales existe un subgrupo que es el de los Coliformes fecales. Los coliformes fecales son coliformes totales que además fermentan la lactosa con producción de ácido y gas en 24-48 horas a temperaturas comprendidas entre 44 y 45 oC en presenciade sales biliares. Los coliformes fecales comprenden principalmente Escherichia Coli y algunas cepas de Enterobacter y Klebsiella.
Su origen es principalmente fecal y por esos se consideran índices de contaminación fecal. Pero el verdadero índice de contaminación fecal es Escherichia coli tipo I, ya que su origen fecal es seguro.
Volumen de agua analizada
El volumen de muestra a filtrar esgeneralmente de 100 ml, excepto para aguas envasadas, en las que se recomienda analizar muestras de 250 ml. Sin embargo, en aguas superficiales y en general en aguas naturales sin tratar, el número de bacterias en 100 ml puede variar desde pocas decenas hasta cientos de millares. La siguiente tabla proporciona unos datos que pueden servir de orientación:
Las muestras comprendidas entre 30 ml y 250 mlse filtran directamente añadiéndolas al embudo de filtración.
Para muestras entre 1 y 30 ml, se añaden primero al embudo 20-30 ml de solución tamponada estéril y, encima de ella, se vierte la muestra que se va a filtrar.
Para todas las muestras inferiores a 1 ml, es preciso realizar previamente diluciones con solución tamponada estéril.
Preparación de diluciones
Material y equipo
Membranasfiltrantes de 0,45 µm de tamaño de poro
Soporte del filtro con embudo
Sistema de vacio
Pipetas estériles de 10 y 1 mL.
Estufa de cultivo
Asa de siembra
Pinzas estériles
Medio de cultivo selectivo para Coliformes Totales: Caldo Endo, MF
Se utiliza el Caldo M-Endo para el recuento de coliformes totales. Este es un medio para el aislamiento selectivo de los coliformes totales pues lleva inhibidorespara el resto de microorganismos. El lauril sulfato y desoxicolato que forman parte de la fórmula del medio permite crecer a los coliformes lactosa positivo pero inhibe el crecimiento del resto de bacterias acompañantes. Las colonias lactosa positivo se colorean de rojo por la liberación de fucsina del sulfato de fucsina. Las colonias de E. coli y de los coliformes muestran generalmente un brillometálico.
Se utiliza este medio para la identificación y recuento de coliformes en agua, leche y otros líquidos mediante filtración sobre membrana y esta incluido en las recomendaciones de la APHA "American Water Works Association and Water Pollution Control Federation: Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 2004 ".
Medio sólido selectivo, que se prepara en placas para...
Información tomada y adaptada de: http://fundacion.usal.es/microaguas
Los coliformes totales son las Enterobacteriaceae lactosa-positivas y constituyen un grupo de bacterias que se definen más por las pruebas usadas para su aislamiento que por criterios taxonómicos. Pertenecen a la familiaEnterobacteriaceae y se caracterizan porsu capacidad para fermentar la lactosa con producción de ácido y gas, más o menos rápidamente, en un periodo de 48 horas y con una temperatura de incubación comprendida entre 30-37ºC.
Son bacilos gramnegativos, aerobios y anaerobios facultativos, no esporulados. Del grupo <
Una elevada proporción de los coliformes que existen en los sistemas de distribución no se debe a un fallo en el tratamiento en la planta, sino a un recrecimiento de las bacterias en las conducciones. Dado que es dificil distinguir entre recrecimiento de coliformes y nuevascontaminaciones, se admite que todas las apariciones de coliformes son nuevas contaminaciones, mientras no se demuestre lo contrario.
Dentro del grupo de los coliformes totales existe un subgrupo que es el de los Coliformes fecales. Los coliformes fecales son coliformes totales que además fermentan la lactosa con producción de ácido y gas en 24-48 horas a temperaturas comprendidas entre 44 y 45 oC en presenciade sales biliares. Los coliformes fecales comprenden principalmente Escherichia Coli y algunas cepas de Enterobacter y Klebsiella.
Su origen es principalmente fecal y por esos se consideran índices de contaminación fecal. Pero el verdadero índice de contaminación fecal es Escherichia coli tipo I, ya que su origen fecal es seguro.
Volumen de agua analizada
El volumen de muestra a filtrar esgeneralmente de 100 ml, excepto para aguas envasadas, en las que se recomienda analizar muestras de 250 ml. Sin embargo, en aguas superficiales y en general en aguas naturales sin tratar, el número de bacterias en 100 ml puede variar desde pocas decenas hasta cientos de millares. La siguiente tabla proporciona unos datos que pueden servir de orientación:
Las muestras comprendidas entre 30 ml y 250 mlse filtran directamente añadiéndolas al embudo de filtración.
Para muestras entre 1 y 30 ml, se añaden primero al embudo 20-30 ml de solución tamponada estéril y, encima de ella, se vierte la muestra que se va a filtrar.
Para todas las muestras inferiores a 1 ml, es preciso realizar previamente diluciones con solución tamponada estéril.
Preparación de diluciones
Material y equipo
Membranasfiltrantes de 0,45 µm de tamaño de poro
Soporte del filtro con embudo
Sistema de vacio
Pipetas estériles de 10 y 1 mL.
Estufa de cultivo
Asa de siembra
Pinzas estériles
Medio de cultivo selectivo para Coliformes Totales: Caldo Endo, MF
Se utiliza el Caldo M-Endo para el recuento de coliformes totales. Este es un medio para el aislamiento selectivo de los coliformes totales pues lleva inhibidorespara el resto de microorganismos. El lauril sulfato y desoxicolato que forman parte de la fórmula del medio permite crecer a los coliformes lactosa positivo pero inhibe el crecimiento del resto de bacterias acompañantes. Las colonias lactosa positivo se colorean de rojo por la liberación de fucsina del sulfato de fucsina. Las colonias de E. coli y de los coliformes muestran generalmente un brillometálico.
Se utiliza este medio para la identificación y recuento de coliformes en agua, leche y otros líquidos mediante filtración sobre membrana y esta incluido en las recomendaciones de la APHA "American Water Works Association and Water Pollution Control Federation: Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 2004 ".
Medio sólido selectivo, que se prepara en placas para...
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