GUI A PRUEBAS BIOQUI MICAS

MEDIOS DIFERENCIALES
Son empleados para detectar reacciones bioquímicas, con carácter diferencial de grupos, géneros o especies microbianas,
mediante el viraje de color del indicador presente en el medio, demostrando algunas de sus características.

TSI ( Triple Sugar Iron)
El TSI es un medio nutriente y diferencial que permite estudiar la capacidad de producción de ácido y gas
a partir dglucosa,sacarosa y lactosa en un único medio. Tambien permite la identificación de la
producción de SH2.

Esta es una prueba específica para la identificación a nivel de género en la familia Enterobacteriaceae,
con objetivo de diferenciar entre:
· bacterias fermentadoras de la glucosa
· bacterias fermentadoras de la lactosa
· bacterias fermentadoras de sacarosa
· bacterias aerogénicas
· bacteriasproductoras de SH2 a partir de sustancias orgánicas que contengan azufre.

CARACTERÍSTICAS:

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COLOR: rojo ladrillo
INHIBIDORES: no tiene
INDICADOR: rojo fenol
SUSTRATOS PRINCIPALES: Lactosa, sacarosa y glucosa (la proporción en el medio de lactosa y sacarosa es de 10:1
con la glucosa)
SUSTRATOS SECUNDARIOS: tiosulfato sodico, peptona, citrato ferrico amoniacal y extractos.
Se siembra porpicadura profunda con aguja y luego se siembra por estria en el pico.

FUNDAMENTO: en es te medio se busca determinar la capacidad de la bacteria para degradar los azucares y la formación de gas y
de H2S. la fermentación aerobica se produce en el pico del tubo y la anaerobica en el fondo del tubo.
La degradación de la lactosa ocurre en la parte superior, la de la sacarosa en la parte intermedia y dela glucosa en la parte
profunda produciéndose un viraje de rojo a amarillo.
El tiosulfato es reducido a H2S quien reacciona con el citrato férrico amoniacal para dar formación a sulfuro de de fierrro que es de
color negro.

La presencia de gas se debe al CO2 producto de la fermentación.

MEDIO DE LIA (Lisina Iron Agar)

CARACTERISTICAS:

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COLOR: Lila
INHIBIDORES: no tiene
INDICADOR:púrpura de bromocresol
SUSTRATOS PRINCIPALES: Lisina y glucosa

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SUSTRATOS SECUNDARIOS: peptona, tiosulfato de sodio, extracto de levadura.
Se siembra por picadura profunda con aguja y luego por estrias en el pico.

FUNDAMENTO: En este medio se permite evidenciar la descarboxilación del aminoácido lisina en la diamina cadaverina, como
también la desaminación de la lisina en un alfa cetoácido.Estas dos reacciones se ponen de manifiesto por el viraje del indicador
púrpura de bromocresol.
La formación de H2S se pone de manifiesto por la presencia del tiosulfato sódico, que dará formación al sulfato férrico.
También puede verificarse la formación de gas a partir de la degradación de la glucosa.

1.- Lisina descarboxilasa positivo

2.- Descarboxilaciòn positiva, H2S positivo

3.-Lisinadescarboxilasa negativa

4.- Lisina desaminasa positivo

Este medio pone de manifiesto:
- Si la bacteria posee la enzima descarboxilasa (LDC). el medio contiene como indicador Purpura de Bromocresol, cuando
la lisina se descarboxila, el medio se acidifica y el indicador vira amarillo en el fondo.
- Si es productora de ác. sulfhídrico, en cuyo caso el precipitado negro nos impedirá ver si es LDC + o -.
-Si es productora de gas.
Esta prueba permite diferenciar los microorganimos que producen descarboxilación o desaminación de la lisina. Se pude
detectar además la producción de SH2 y es más sensible que el TSI para la detección de SH2. Es muy utilizado para
descartar Salmonella de aislamientos primaros. Se lee igual que el KIA.

CITRATO SEGÚN SIMMONS

CARACTERÍSTICAS: Esta prueba sirve paradeterminar si un organismo es capaz de utilizar citrato como única
fuente de carbono y compuestos amoniacales como única fuente de nitrógeno en su metabolismo, provocando una
alcalinización del medio. Entre las enterobacterias estas características se dan en los siguientes géneros: Enterobacter,
Klebsiella, Serratia, Citrobacter y algunas especies de Salmonella. Sin embargo, Escherichia, Shigella,...