Gui N De Pr Cticas De FAII 2014 15

Guión de Prácticas de Fisiología Animal II. Curso 2014-15

Facultad de Ciencias. UMA

GUIÓN DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO DE
FISIOLOGÍA ANIMAL
3º CURSO. GRADO EN BIOLOGÍA
Curso 2014-15
FACULTAD DE CIENCIAS

ÍNDICE
1. Absorción de glucosa en el intestino aislado de hámster I……………1
2. Absorción de glucosa en el intestino aislado de hámster II ............ ….5
3. Parámetrossanguíneos……………………………………………….......6
4. Carbohidrasas del sistema digestivo .............................................. …12
5. Presión arterial y membrana corioalantoidea ................................. …16
6. Fisiología del sistema renal………………………………………………18

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Facultad de Ciencias. UMA

PRÁCTICAS 1 Y 2: ABSORCIÓN DE GLUCOSA EN EL INTESTINO
AISLADO DE HÁMSTER (I y II)
CONTENIDO DE LA PRÁCTICA
1.Absorción de glucosa en condiciones fisiológicas. Efecto de la temperatura y del
oxígeno (sesión I).
2. Efecto del sodio, la ouabaina, el dinitrofenol y la galactosa sobre la absorción de
glucosa (sesión II).
OBJETIVOS
1. Demostrar y cuantificar la absorción de glucosa en el intestino.
2. Examinar la dependencia de varios factores ambientales.
INTRODUCCIÓN
Los monosacáridos y otros productos dela digestión deben ser transportados a través de la
pared intestinal hasta la circulación. El transporte de glucosa a través de la pared intestinal
de mamíferos se realiza mediante un mecanismo activo consumidor de energía. El proceso
es, por tanto, sensible a los inhibidores químicos que bloquean las reacciones celulares
liberadoras de energía.
El sistema de transporte responsable de la absorciónintestinal de la glucosa es impulsado
por la energía almacenada en los gradientes iónicos y no directamente por la hidrólisis del
ATP. Existe un sistema cotransportador unidireccional en el que la glucosa y el Na+ se unen
a diferentes sitios de la proteína transportadora en la membrana apical de la célula
absorbente; el Na+ tiende a penetrar en la célula siguiendo su gradiente electroquímico y,en
cierto sentido, arrastra consigo a la glucosa.
La absorción de glucosa puede demostrarse en segmentos aislados e invertidos de intestino
delgado, observando los cambios de concentración de glucosa en los dos compartimentos
(lado mucosal y lado serosal) que se crean mediante la técnica de la inversión del saco
intesinal (Crane y Wilson 1958).
Si se ponen en ambos compartimentos concentracionesiguales de glucosa, cualquier
cambio de concentración en alguno de los dos compartimentos será debido a un transporte
unidireccional contra gradiente.
MATERIAL
- Solución de Krebs-fosfato: contiene NaCl (0.154M), KCl (0.154 M), CaCl2 (0.11 M),

SO4Mg (0.154 M), PO4HNa2 (0.1 M), PH 7.4. Se puede conservar durante 1 semana.
- Solución de Krebs-fosfato sin Na+: tiene la misma composición que la anteriorpero el
NaCl se sustituye por LiCl y el PO4HNa2 por PO4HK2. Puede conservarse durante 1
semana.
- Solución de Krebs-fosfato-glucosa: contiene Krebs-fosfato con glucosa (con o sin Na+) a
una concentración 2 mM. Preparar diariamente.
- Solución de Krebs-fosfato-glucosa con ouabaina 1 mM. Se prepara diariamente. Usar
guantes.
- Solución de krebs-fosfato-glucosa con 2,4-Dinirofenol 1 mM. Preparardiariamente. Usar
guantes.
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- Solución salina para el lavado de las porciones de intestino.
- Pipetas Pasteur con reborde de plástico en la punta.
- Hilo de sutura o similar.
- Jeringas de 1 ml con cánula de plástico conectada al extremo.
- Baño termostático, baño de hielo y sistema de burbujeo de oxígeno(Oxígeno industrial B-

50. Air Liquide).
- Kit de determinación de glucosa (método glucosa oxidasa)
- Espectrofotómetro.
- Hamsters adultos jóvenes (2 por sesión de prácticas).
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Preparación del sistema de baño de órganos. Consiste en un tubo de ensayo de vidrio
grande (aproximadamente 50 ml) donde se ponen unos 25-30 ml de solución...