GUIA BIOQUIMICA 2016

ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS FISIOLÓGICAS
UNIVERSIDAD DE ORIENTE - NÚCLEO BOLÍVAR

MANUAL DEL LABORATORIO DE
BIOQUÍMICA PARA MEDICINA
EDICIÓN ENERO 2016

Docentes:
Profesor Titular:
Dr. Miguel Basanta
Profesor Asociado:
MSc. Bit Betancourt
Profesor Asistente:
Dr. Jesús Cedeño

Bioanalista:
Lcda. Lexa Manrique
Asistentes de Laboratorio:
Br. Érica Arias
Br. JesúsPalacios
Secretaria:
TSU. Yuriman Nuñez

Profesores Instructores:
Lic. Duglas Bermúdez
Lic. Rafael González,
Licda. Zulay castillo
Licda. Inaidez Salazar

HORARIO
Días: LUNES a VIERNES
Hora: 9:00 a.m. a 12:00 p.m.
MANUAL PRÁCTICO DEL LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

1

CONTENIDO
PRÁCTICA 1:
ESTUDIO DE LAS PROPIEDADES IÓNICAS DE LOS AMINOÁCIDOS. MÉTODOS DE
TITULACIÓN DE LOS GRUPOS FUNCIONALES.............................................................................. 3
PRÁCTICA2:
“SALADO" (SALTING OUT) DE PROTEÍNAS, SU APLICACIÓN EN LA
SEPARACIÓN Y DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA Y GLOBULINAS EN SUERO O
PLASMA SANGUÍNEO. ....................................................................................................................... 11
PRÁCTICO 3:
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA AMILASASALIVAL............................................................... 16
PRÁCTICA 4:
ENZIMOLOGÍA: ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD DE L-LACTATO: NAD+ OXIDOREDUCTASA EN EL MÚSCULO, HÍGADO Y CORAZÓN DE ANIMALES DE
EXPERIMENTACIÓN ........................................................................... ¡Error! Marcador no definido.
PRÁCTICA 5:
METABOLISMO INTERMEDIARIO. EFECTO DEL AYUNO SOBRE EL CONTENIDO DEL
GLUCÓGENOHÉPATICO ................................................................................................................... 38

MANUAL PRÁCTICO DEL LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

2

PRÁCTICA 1: ESTUDIO DE LAS PROPIEDADES IÓNICAS DE LOS
AMINOÁCIDOS. MÉTODOS DE TITULACIÓN DE LOS GRUPOS
FUNCIONALES
OBJETIVO GENERAL
Analizar el comportamiento ácido-base de los aminoácidos disueltos en solución acuosatitulando
con una base fuerte y determinar el número de funciones ionizables, el valor del pKa y de pKb
correspondiente a cada función.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Titular un aminoácido problema con una solucion de hidróxido de sodio.
Diferenciar un aminoácido básico, ácido y neutro de acuerdo a sus pKs.
Aplicar ecuación Henderson-Hasselbalch a los sistemas amortiguadores fisiológicos.Explicar la función amortiguadora que poseen las proteínas desde el punto de vista estructural.
Definir las propiedades químicas de los aminoácidos como unidad estructural de las proteínas.
Reconocer en los sistemas proteicos los grupos ionizables responsables de generar la máxima c
apacidad amortiguadora tomando como criterio su pKs.
7. Analizar el comportamiento de los aminoácidos en su puntoisoeléctrico.

I.

ASPECTOS TEÓRICOS

Consideraciones Generales
Todos los aminoácidos encontrados en las proteínas, presentan grupos aminos y grupos
carboxílicos como constituyentes.
La mayor parte de los aminoácidos, poseen grupos aminos, grupos carboxílicos y otros grupos
tales como: Guanidino, Imidazol, Fenólico, Alcohólico, Tiol, etc.

Propiedades químicas
Todos los aminoácidos poseen la capacidadde donar (ACIDO) o aceptar (BASE) protones de
acuerdo al medio donde se encuentre.
La fuerza con la cual el grupo carboxílico cede sus protones es mayor a la fuerza del grupo
amino protonado cede los suyos; por lo tanto, mientras mayor sea el valor numérico de la
constante de disociación (Ka) mayor grado de disociación presentará la sustancia y más fuerte
será el ácido débil. INVESTIGAR ELCONCETO DE Ka.
El grado de acidez de una solución acuosa depende de la concentración de protones presentes
+
en solución y se conoce como pH y su definición viene dada por la expresión: pH = ]
La expresión que relaciona las constantes de disociación de un ácido débil, su concentración y
el pH de una solución acuosa viene dada por la ecuación de HENDERSON-HASELLBACH.
MANUAL PRÁCTICO DEL LABORATORIO DE...