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Guía No 8
ANALISIS CUANTITATIVO DE TIAMINA VITAMINA HIDROSOLUBLE ESPECTROSCOPIA VISIBLE
OBJETIVOS
-Cuantificar vitamina B1 (tiamina) utilizando espectroscopia visible.
-Elaborar la curva decalibración y hallar la concentración de una muestra problema.
INTRODUCCIÓN
TIAMINA: vitamina que se encuentra en los alimentos en forma libre o como éster pirofosfato formando un complejo con lasproteínas. Las técnicas analíticas habituales no distinguen entre estas dos formas y tampoco lo hacen las tablas de composición de de alimentos. Son especialmente ricos en vitamina B1, las levaduras,gérmenes de cereales, la carne de cerdo y las nueces. Los métodos de laboratorio propuestos para el análisis de tiamina, se pueden clasificar en microbiológicos, químicos y físicos, cada uno de ellostiene ventajas e inconvenientes que limitan en algunas ocasiones su utilidad.
Las técnicas analíticas que más se emplean son fluorimétricas, entre las cuales se destaca la oxidación a tiocromo.Otros métodos como los colorimétricos se utilizan para cuantificar muestras cuya procedencia sea preferiblemente de medicamentos, con el fin de disminuir la interferencia, debido a que para analizar latiamina presente en un alimento es necesario extraerla mediante largos tratamientos enzimáticos.
Reactivos
Tiamina mononitratoAcetona
Sal de Reinecke [(SCN)4(NH3)2Cr]NH4.H2OTampón acetato pH=4.5(acetato de
Solución de lavadosodio y ácido acético glacial).
Solución de Reinecke: 0,5 g en 25 mL de agua
Materiales
5 balones aforados de 25 mL2 balones aforados de 250 y 50 mL2 vasos deprecipitados de 50 y 150 mL3 pipetas aforadas de 1,5,10 mLUn mortero y su pistilo
Agitador magnético
Un kitasatoPapel de filtro
Bomba de vacioMaterial De Prueba
Vitamina hidrosoluble: B1,
ProcedimientoTiamina
Pesar 0.1 g de tiamina mononitrato y adicionar 100 mL de buffer acetato pH 4,5, agitar mecánicamente por media hora.
A la solución anterior agréguele 10 mL de la solución de sal de...