guia lipidos
Practico Nº 2: Determinación de Lípidos
Método de Bligh Dyer:
1. Se debe determinar la humedad de la muestra para mantener la relación de cloroformo, metanoly agua, en las diferentes etapas de análisis. Es indispensable ajustar la humedad de la muestra a un 80 +/- 1%, pues las relaciones de volumenes de cloroformo, metanol y agua deben ser de 1:2:0.8 y de2:2:1.8 luego de la dilución.
2. Se pesan 10 g de pasta homogénea en un vaso precipitado.
3. Se agregan 10 ml de cloroformo y 20 ml de metanol.
4. Se extrae utilizando agitador magnético durante10 minutos.
5. Se agregan 10 ml de cloroformo y se homogeniza durante 5 minutos.
6. Se agregan 10 ml de agua y se vuelve a homogenizar durante 5 minutos.
7. Se vierte el líquido en una probetagraduada de 100 ml, para que la extracción sea cuantitativa se enjuaga el vaso precipitado que contenía la muestra con 10 ml de cloroformo y se vierte en la probeta.
8. Se deja reposar la mezclacloroformo metanol, hasta observar una completa separación de dos fases.
9. Se lee el volumen de la capa clorofórmica.,
10. Se retira la capa metanol agua, por aspiración retirando también un pequeñovolumen de la capa clorofórmica para asegurar la completa remoción de la capa superior.
11. Se pipetean 10 ml de la capa clorofórmica y se llevan a un recipiente previamente tarado.
12. Se evapora elcloroformo a 40ºC en un baño termostatado.
13. Se lleva a estufa a 105ºC durante 1 hr.
14. Se enfría en desecador y se pesa.
15. Se repite el procedimiento hasta llegar a peso constante.Cálculos:
-% Lípidos en base seca.
- % Lípidos en base Húmeda.
Método Soxhlet:
1. Se pesa en un cartucho de papel filtro previamente tarado 5 a 6 g demuestra.
2. Se cierra el cartucho y se coloca en la cámara central del aparato de soxhlet.
3. Se instala el equipo de extracción.
4. Se agrega la cantidad necesaria de éter de petróleo hasta...
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