Guia Reconocimiento De Aminoacidos

GUIA No 1 ENSAYOS PARA RECONOCIMIENTO DE AMINOACIDOS

I. EL PROBLEMA
El carácter único de cada α-aminoácido se debe a la estructura del grupo R. En los polipéptidos los grupos R de los aminoácidos a menudo se denominan cadenas laterales y pueden variar desde un átomo de hidrógeno, hasta estructuras complejas como el grupo guanidina, el propósito de esta práctica es identificar algunosaminoácidos que presentan grupos característicos en las cadenas laterales utilizando ensayos cualitativos y específicos para cada función.

II. FUNDAMENTO TEÓRICO
Los aminoácidos tienen un papel primordial en la formación de los seres vivos, puesto que constituyen los bloques fundamentales con que se forman las proteínas.
Entre las principales reacciones de identificación de los aminoácidos seencuentran las siguientes:

Reacción con la ninhidrina
El grupo alfa-amino de los aminoácidos forma complejos coloreados con la ninhidrina: violeta azuloso en la mayoría de los aminoácidos cuyo grupo amino es primario, amarillo para la prolina e hidroxiprolina y café para la asparagina que tiene un grupo amido en la cadena lateral. Esta reacción también identifica los grupos alfa-amino presentes enpéptidos y proteínas.

Reacción de Millón
El anillo fenólico tiene un comportamiento característico frente a las sales de Mercurio a pH ácido, formando complejos color rojo ladrillo con el anillo fenólico de la tirosina, péptidos o proteínas que la contienen.

Reacción Xantoprotéica
Los anillos aromáticos presentes en algunos aminoácidos reaccionan con ácido nítrico concentrado formandonitroderivados de color amarillo o anaranjado por lo cual esta reacción permite reconocer la presencia de Tirosina y Triptófano.

Reacción de Sakaguchi
El grupo guanidinio presente en la cadena lateral de la Arginina reacciona con soluciones de alfa-naftol en presencia de Bromo en medio alcalino formando complejos coloreados rosados o rojos.

Reacción de Ehrlich
La presencia de anillos aromáticosfenólicos o nitrogenados en la cadena lateral de los aminoácidos se puede identificar mediante la reacción con ácido sulfanílico y nitrito de sodio por formación de sales de diazonio fuertemente coloreadas permitiendo así detectar la presencia de Tirosina e Histidina libres o formando péptidos y proteínas.

Reacción de Hopkins Cole
El anillo indólico presente en la cadena lateral de losalfa-aminoácidos libres o haciendo parte de péptidos y proteínas se puede reconocer mediante reacción con el ácido glioxílico a pH ácido, puesto que forma complejos de coloración violeta o amarillo violeta, permitiendo así identificar al triptófano.

Reacción con acetato de Plomo alcalino
Los Aminoácidos azufrados como Metionina, Cisteina y Cistina se reconocen por la formación de precipitados deSulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro que se forman cuando reacciona con Acetato de Plomo en medio alcalino.

III. TEMAS DE CONSULTA
El preinforme debe contener los siguientes aspectos:

a-Función biológica breve de la(s) proteína(s) que constituyen a sus muestras de estudio.

b- Tabla con la composición de aminoácidos de la muestras que le correspondieron en su grupo de laboratorio.IV. MATERIALES Y REACTIVOS
Las soluciones están propuestas para cada grupo de trabajo en el laboratorio, por ejemplo 10 ml de ninhidrina para un grupo, si el curso es de 8 grupos se requieren máximo 80 ml de ninhidrina.
Materiales
15 Tubos de ensayo
2 Pipetas graduadas de 1 ml.
2 Pipetas graduadas de 2 ml.
2 Pipetas graduadas de 5 ml.
2 Vasos de precipitados de 250 ml.
1 Vasos deprecipitados de 600 ml.
1 Embudo ordinario
1 Erlenmeyer de 125 ml.
1 Gradilla para tubo de ensayo
1 Pinza metálica para tubo de ensayo
1 Placa refractaria

Material general
Para prevenir la contaminación de los reactivos: las soluciones que no estén en frasco gotero deben tener una pipeta exclusiva y el monitor debe estar pendiente, que las pipetas no sean intercambiadas durante al práctica....