Guia Trabajos Practicos microbiologia UBA 2010

MICROBIOLOGÍA
E
INMUNOLOGÍA
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA BIOLÓGICA
FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES
UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES

GUÍA DE TRABAJOS PRÁCTICOS
2010

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TP N°1
A) MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN
OBJETIVO
Adquirir experiencia en el manejo de equipos de esterilización y aplicar métodos de desinfección y
esterilización empleando distintosagentes físicos o químicos.
Agentes físicos
Calor húmedo (autoclave)
El alumno se familiarizará con el uso del autoclave que incluye:
1- Preparación del material a autoclavar.
2- Carga del autoclave con el material a esterilizar o decontaminar.
3- Cierre del autoclave y encendido.
4- Eliminación del aire contenido en su interior (hasta emisión de chorro continuo de vapor por la
espita oválvula de descarga).
5- Cierre de la válvula de descarga y control hasta llegar a la presión de esterilización deseada.
6- Control del tiempo de esterilización requerido.
7- Apagado del autoclave.
8- Apertura de la válvula para igualar presiones.
9- Retirado y secado del material autoclavado.
Se esterilizarán distintos materiales de vidrio y otros que resistan la temperatura, como así tambiénsoluciones y medios de cultivo.
También se decontaminará material que contenga cultivos bacterianos (en especial cultivos de
microorganismos que forman esporas).
Se harán controles de esterilidad después del autoclavado para verificar que el proceso fue eficiente.
Calor seco (horno)
1- Preparación del material a hornear.
2- Carga del horno.
3- Control hasta llegar a la temperatura deesterilización.
4- Control del tiempo de esterilización.
5- Apagado, enfriado y apertura del horno.
Se esterilizarán materiales que no puedan ser autoclavados y/o que resistan altas temperaturas.
Incineración por llama
El alumno adquirirá práctica en el flameado de la boca de botellas, frascos y tubos y en la
esterilización y decontaminación del ansa que se emplea para transferir cultivosbacterianos.
Radiación ultravioleta
Se empleará la radiación ultravioleta como agente desinfectante o esterilizante.
Se pondrán debajo de la luz U.V. objetos que no puedan autoclavarse ni hornearse ( Ej: tapas
plásticas, membranas filtrantes, etc.).
Filtración
Se procederá a esterilizar líquidos que contienen componentes sensibles al calor como proteínas,
vitaminas, antibióticos y solucionessalinas definidas.

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Se emplearán filtros de celulosa utilizando vacío o presión positiva.
Agentes químicos
Se emplearán distintos agentes germicidas y desinfectantes (soluciones de hipoclorito de sodio,
cloroxilenol, formaldehído, etc.) para desinfectar superficies.
Se analizará la reducción de la cantidad de microorganismos presentes en una mesada de trabajo,
pasando un hisopo con el quese sembrarán placas conteniendo agar nutritivo, antes y después de
haber sido tratada con el desinfectante en cuestión.
Bibliografía:
Seeley, H.W.Jr.; Vandermark, P.J., Lee, J.J., ¨Microbes in action. A laboratory manual of
microbiology¨. Editores W. H. Freeman and Company, Cuarta Edición, Capítulo 5, 1991.
Tortora G.J., Funke B.R., Case C.L. Introducción a la Microbiología. EditorialAcribia SA,
Zaragoza España, 1993.
Vullo D.L., Wachsman M.B., Alché L.E. Microbiología en Práctica. Editorial Atlante S.R.L.
Buenos Aires, 2000.

B) MICROORGANISMOS DEL MEDIO AMBIENTE
(OBSERVACIÓN MACROSCÓPICA)
OBJETIVOS
- Observar la gran variedad de microorganismos presentes en el medio ambiente (laboratorio de
T.P.), determinando las diferentes morfologías de colonias que se obtienen.
-Poner de manifiesto la necesidad de trabajar en estricta esterilidad en microbiología debido a la
gran facilidad con que se puede contaminar el material de trabajo.
DESARROLLO DEL PRÁCTICO
1- Exponer placas con agar nutritivo al medio ambiente durante distintos tiempos.
2- Estriar con un hisopo previamente pasado por la mesada de trabajo sobre una placa con agar
nutritivo.
3- Incubar las...