HEMATOLOGIA

TINCION DE WRIGHT
Tinción son un conjunto de procesos que conducen a la coloración de las estructuras. Esto tiene por objeto el aumentar el contraste entre esas estructuras y el medio que las rodea, y permite por tanto que las células sean visualizadas microscópicamente con mayor facilidad.

FUNDAMENTO
La tinción de wright cuyo colorante está compuesto de azul de metileno (que tiñe de colorazul las partes acidas de las células) y eosina (que tiñe las partes alcalinas) disueltos en metanol (que permite la fijación de las células), adicionando a la preparación buffer de fosfatos (que rehidrata a las células después de la exposición con metanol) 

PROCEDIMIENTO
Colocar una gota de sangre o impronta de células.
Hacer la extensión de las sangre con un movimiento suave y firme.
Secaral aire
Cubrir el frotis completamente con el colorante de wright durante 7 minutos.
Sin tirar el colorante agregar el buffer de fosfatos durante 15 minutos. 
Decantar y enjuagar con agua destilada.
Observar al microscopio. 

USOS EN VIROLOGIA
Se utiliza para el diagnóstico de virus como:

Herpes simple
Varicela y herpes zoster
Citomegalovirus
Síndrome Hemofagocitico por Virus deEpstein-Barr

PRUEBA TZANCK
consiste en hacer una impronta de las células y teñirlas con la tincion de Wright, y observar células fusionadas con varios núcleos, sincitios, así como inclusiones nucleares de Cowdry.

 
Coloración de WrightLa tinción de Wright es una tinción de tipo Romanowsky; la cuales se han utilizado por más de 100años en la clasificación morfológica de las célulashematopoyéticas. Son extremadamenteimportantes en laboratorios de hematología ya que puede obtenerse una cantidad abundante deinformación a partir del examen de un frotis de sangre bien teñido.Una tinción de Romanowsky consiste en azul de metileno y sus productos de oxidación; así comocolorantes así como eosina Y o eosina B. La acción combinada de estos colorantes produce elefecto Romanowsky y da unacoloración púrpura a los núcleos de los leucocitos y a los gránulosneutrofílicos y de color rosado a los eritrocitos. Los componentes de este efecto son el azul B y laeosina Y. Las propiedades de tinción de Romanowsky dependen del enlace de los colorantes a lasestructuras químicas y de las interacciones del azul B y la eosina Y. Los agrupamientos de ácidosnucleicos, las proteínas de los núcleos celulares yel citoplasma inmaduro reactivo, fijan el azul B,colorante básico. La eosina Y, colorante ácido, se fija a los agrupamientos básicos de las moléculasde hemoglobina y a las proteínas básicas.El proceso de tinción empieza con el paso de fijación con metanol que resulta en la adherencia delas proteínas celulares al portaobjetos y evita que las células se deslaven durante los pasossubsecuentes. Lafijación adicional se realiza cuando el frotis se cobre con el colorante de Wright;la tinción efectiva se da con la adición de un amortiguador al colorante que da lugar a la ionizaciónde los colorantes. Después se enjuaga con agua destilada y se deja secar al aire.Fig. 1 Tinción de WrightTinción de PerlsDentro de los diversos procesos que afectan el metabolismo del hierro, en forma aisladao enasociación con otros trastornos, se ha observado la acumulación de hierro medular en cuadroscomo anemia hemolítica crónica, anemia sideroblástica y hemocromatosis. La determinación deestos depósitos acumulados en forma anormal puede realizarse con la tinción de Perls, que formaparte de la batería de tinciones citoquímicas aplicadas principalmente a neoplasias hematológicasy otros síndromes.Determina lapresencia de hemosiderina en el citoplasma de cualquier tipo de células, de unaextensión de sangre o de médula. El proceso de tinción comienza con una fijación de alcoholmetílico, se introduce la extensión fijada en solución clorhídrica de ferrocianuro a temperaturaambiente, después se lava y contratiñe con hematoxilina de Harris; finalmente se enjuaga conmetanol se deja secar y se observan...