hematologia

Técnicas inmunohematologicas por aglutinación
Las reacciones de aglutinación y de precipitación son la base de la mayor parte de las técnicas inmunológicas. Su principio se basa en la reacción antígeno-anticuerpo. Para comprender lo anterior es necesario definir qué es un antígeno y un anticuerpo. Antígeno es una sustancia de alto peso molecular, con cierta rigidezestructural y que tiene la particularidad de ser parcialmente “metabolizado” por células especializadas llamadas macrófagos, por lo tanto es capaz de generar una respuesta inmune en un organismo qué la detecte como un agente extraño. Mientras que un
Anticuerpo es una glicoproteína, producida por linfocitos activados, llamados células plasmáticas, como respuesta a la presencia de un antígeno en elorganismo, a su vez los anticuerpos pueden ser producidos por líneas celulares in vitro, como es el caso de la producción de anticuerpos monoclonales. Dichos anticuerpos llamados también inmunoglobulinas, se presentan en cinco clases principales, IgG, IgM, IgA, IgD e IgE, que se diferencian entre sí por sus características físicas, químicas ybiológicas.1,2,3La capacidad inmunogénica de distintaspartículas, es en orden decreciente la siguiente: proteínas, glicoproteínas, polisacáridos, lípidos y azúcares. Las reacciones de precipitación son medibles en cantidad y son fáciles de ejecutar. Las técnicas de aglutinación son sólo semi cuantitativas y algo más difíciles. La aglutinación de los antígenos nativos insolubles o de las partículas recubiertas por el antígeno puede evaluarse a simplevista con o sin la ayuda del microscopio. Entre las ventajas de las reacciones de aglutinación están su alto grado de sensibilidad y la enorme variedad de substancias identificables a través del uso de partículas que están
Recubiertas por antígeno o por anticuerpo. Según Coombs existen 3 requerimientos principales
En las pruebas de aglutinación:
1. Disponibilidad de una suspensión estable decélulas o de partículas.
2. Presencia de uno o más antígenos cercanos a la superficie.
3. Conocimiento de que los anticuerpos "incompletos “o no aglutinarles no son localizables sin modificación (reacciones anti globulina).
Clasificación de las reacciones de aglutinación
Aglutinación directa
Un antígeno celular o de partículas insolubles es aglutinado directamente por el anticuerpo. Un ejemplode esto es la aglutinación de los eritrocitos del grupo A por antisueros anti-A, la aglutinación de los eritrocitos RH positivos por el antisuero anti-D o la aglutinación del antígeno brucelar por anticuerpos anti-Brucella. Gran cantidad de partículas como pueden ser eritrocitos, bacterias, hongos y virus pueden ser aglutinados por anticuerpos séricos, algunas veces de manera inespecífica yotras muy específicas, siendo ésta última, respuesta a una previa inmunización del organismo productor de los anticuerpos séricos. Las pruebas para identificar anticuerpos específicos son llevadas a cabo titulando seriada mente antisueros en diluciones al doble en
Presencia de una cantidad constante de antígeno.
Aglutinación indirecta
Se refiere a la aglutinación de las células recubiertas deantígeno o a las partículas inertes que son portadoras pasivas de antígenos solubles. Se tienen ejemplos de lo anterior en la utilización de partículas de gelatina en la búsqueda de anticuerpos contra Treponema palidez por aglutinación pasiva (TPPA), la fijación del látex parador en la sífilis y en la utilización de eritrocitos en la prueba de hemaglutinación indirecta (HAI) en la búsqueda deanticuerpos contra Tripanosoma cruzi, agente causal de la enfermedad de Chagas. De manera alterna, el antígeno puede ser localizado recubriendo partículas de látex o eritrocitos con anticuerpo purificado y practicando
la llamada aglutinación inversa. Hemaglutinación viral Otra categoría de aglutinación que involucra la aglutinación espontánea de los eritrocitos por ciertos virus, es la reacción de...